Turli virusli infektsiyalarga serologik reaktsiyalar. Yuqumli kasalliklar diagnostikasida serologik reaksiyalar. Komplement fiksatsiya reaksiyasi

Diagnostika uchun virusli kasalliklar Quyidagi usullar qo'llaniladi:

1) Virusoskopik.

2) Immun elektron mikroskopiya.

3) Virusologik.

4) Serologik.

5) Immunfloresan.

6) biologik.

7) DNK (RNK) zondlaridan foydalanish.

8) Polimeraza zanjiri reaksiyasi.

Hujayra madaniyatida viruslarning ko'payishi (ko'payishi) mikroskopik tarzda aniqlanishi mumkin bo'lgan va hujayralardagi morfologik o'zgarishlar bilan tavsiflangan sitopatik ta'sir (CPE) bilan baholanadi.

Viruslarning CPD tabiati ularni aniqlash (indikatsiya) uchun ham, taxminiy identifikatsiya qilish uchun ham, ya'ni ularning turlarini aniqlash uchun ishlatiladi.

Viruslarni aniqlash usullari:

1) Gemadsorbtsiya reaktsiyasi - ular ko'payadigan hujayralar sirtining qizil qon hujayralarini adsorbsiyalash qobiliyatiga asoslangan - gemodsorbsiya reaktsiyasi. Uni viruslar bilan kasallangan hujayralar madaniyatiga joylashtirish uchun eritrotsitlar suspenziyasi qo'shiladi va bir muncha vaqt aloqa qilgandan so'ng hujayralar natriy xloridning izotonik eritmasi bilan yuviladi. Birlashgan qizil qon hujayralari virus bilan zararlangan hujayralar yuzasida qoladi.

2) Gemagglyutinatsiya reaksiyasi (HR). U hujayra madaniyatining kultura suyuqligida yoki tovuq embrionining chorioallantoik yoki amniotik suyuqliklarida viruslarni aniqlash uchun ishlatiladi.

Sinov materialida o'ziga xos antikorlarni ham, virusli antijenlarni ham aniqlash uchun serologik usullardan foydalanish mumkin. Ushbu maqsadlar uchun barcha ma'lum serologik reaktsiyalardan foydalanish mumkin:

1) Komplement fiksatsiya reaksiyasi.

2) Passiv gemagglyutinatsiya reaksiyasi va uning variantlari (RNAg, RNAt).

3) Gemagglyutinatsiyani inhibe qilish reaksiyasi.

4) Immun adezion gemagglyutinatsiya reaksiyasi (kompleman ishtirokida antigen + antikor kompleksi eritrotsitlarda adsorbsiyalanadi).

5) Geldagi cho'kma reaktsiyalari.

6) Virusni zararsizlantirish reaksiyalari.

7) Radioimmun usuli.

8) Ferment immunoassay usullari.

Ro'yxatga olingan usullardan ferment immunoassay usullari tobora ommalashib bormoqda, ular yuqori o'ziga xoslik va foydalanish qulayligi bilan ajralib turadi.

7. Gripp viruslarida gemagglyutinatsiya reaksiyasi, uning mexanizmi. Gemagglyutinatsiyani inhibe qilish reaksiyasi, uning amaliy qo'llanilishi.

Gemagglyutinatsiya reaktsiyasi (HR). U hujayra madaniyatining kultura suyuqligida yoki tovuq embrionining chorioallantoik yoki amniotik suyuqliklarida viruslarni aniqlash uchun ishlatiladi.

8. Virusga qarshi immunitetning xususiyatlari. Fagotsitoz va gumoral omillarning immunitetdagi roli. Interferonlar, asosiy xossalarining xarakteristikalari, tasnifi. Interferonlarning viruslarga ta'sir qilish xususiyatlari .

Barcha immunitet tizimlari tanani viruslardan himoya qilishda ishtirok etadi, ammo antiviral immunitet muhim o'ziga xos xususiyatlarga ega. Ular organizmga virusning kirib borishiga birinchi bo'lib javob beradigan komplement va makrofag tizimlari emas, balki interferon va T-qotil hujayra tizimlari ekanligi bilan belgilanadi. Immunitet shakllanishining yana bir xususiyati viruslarning B limfotsitlariga zaif antijenik ta'sir ko'rsatishi va ularning faollashishi, ko'payishi va differentsiatsiyasi T yordamchi hujayralarining ishtirokini talab qiladi va shunga mos ravishda ikkinchisining qayta ishlangan virus antijeni (peptid fragmentlari) taqdim etilishi bilan bog'liq. ) MHC II sinf molekulalari ishtirokida. Shuning uchun makrofaglar va boshqa antigen taqdim qiluvchi hujayralarning roli fagotsitozning o'zi emas, balki antigenni qayta ishlash va taqdim etishdir.

Virusning kirib borishiga birinchi javob interferon tizimi bo'lib, viruslarning hujayra ichidagi ko'payishini bostiradi. Bundan tashqari, qon zardobida mavjud bo'lgan a- va b-ingibitorlari antiviral ta'sirga ega. Alfa inhibitori a-globulinlarning bir qismi bo'lgan termostabil substrat bo'lib, viruslarning hujayraga adsorbsiyasini oldini oladi va orto- va paramiksoviruslarning neyraminidazasi tomonidan yo'q qilinadi. Beta-ingibitor - bu issiqlikka chidamli mukopeptid, b-globulinlarning bir qismi, orto- va paramiksoviruslarning ko'payishini bostiradi.

Biroq, interferonlar va inhibitorlar viruslardan himoya qilish uchun etarli emas edi, shuning uchun tabiat tana darajasida viruslarga qarshi boshqa, juda kuchli himoya mexanizmini yaratdi. U asosan T-sitotoksik limfotsitlar va boshqa qotil hujayralar bilan ifodalanadi. Bu hujayralar ularga MHC I sinf molekulalari tomonidan taqdim etilgan barcha begona antigenlarni, shu jumladan virusli antijenlarni taniydi.T-qotil hujayralarning asosiy biologik ahamiyati begona antigenlar bilan zararlangan har qanday hujayralarni aniqlash va yo'q qilishdir.

Interferon - bu immun tizimining hujayralari tomonidan sintez qilinadigan glikoprotein oqsillari oilasi va biriktiruvchi to'qima. Qaysi hujayralar interferonni sintez qilishiga qarab, uch tur ajratiladi: ?, ? va?-interferonlar.

Alfa interferon leykotsitlar tomonidan ishlab chiqariladi va leykotsitlar deb ataladi; beta interferon fibroblastik deb ataladi, chunki u fibroblastlar - biriktiruvchi to'qima hujayralari tomonidan sintezlanadi va gamma interferon immun deb ataladi, chunki u faollashtirilgan T-limfotsitlar, makrofaglar, tabiiy qotil hujayralar, ya'ni immun hujayralari tomonidan ishlab chiqariladi.

Viruslar bilan kasallanganda interferon ishlab chiqarish keskin oshadi; virusga qarshi ta'sirga qo'shimcha ravishda, interferon o'simtaga qarshi himoyaga ega, chunki u o'simta hujayralarining ko'payishini (ko'payishini) kechiktiradi, shuningdek immunomodulator faollikni, fagotsitozni rag'batlantirishni, tabiiy qotil hujayralarni, antikorlarni tartibga solishni rag'batlantiradi. B hujayralari tomonidan ishlab chiqarish, asosiy histo-moslashuv kompleksining ifodasini faollashtiradi.

Harakat mexanizmi. Interferon hujayradan tashqaridagi virusga bevosita ta'sir qilmaydi, balki maxsus hujayra retseptorlari bilan bog'lanadi va oqsil sintezi bosqichida hujayra ichidagi virusni ko'paytirish jarayoniga ta'sir qiladi.

Xususiy virusologiya

1. O'tkir respirator kasalliklarni (ARI) keltirib chiqaradigan viruslar. Tasniflash. umumiy xususiyatlar ortomyxoviruslar. Gripp virionining tuzilishi. Uning genomining xususiyatlari va undagi ma'lumotlarni amalga oshirish. Virion RNK replikatsiyasi.

1.Viruslar o'tkir respiratorli infektsiyalarning qo'zg'atuvchisi hisoblanadi. tasnifi.

O'tkir respiratorli infektsiyalarning qo'zg'atuvchisi quyidagi viruslardir:

1. Gripp viruslari A, B, C (Orthomyxoviridae)

2. Paramiksoviruslar (Paramyxoviridae) - bu oila uchta avlodni o'z ichiga oladi: paramiksovirus - odamning paragrip viruslari (HPIV) 1, 2, 3, 4 turlari, Nyukasl kasalligi, parranda parainfluenza va parotit; Pnevmovirus - respirator sinsitial virus (RS virusi); Morbillivirus - qizamiq virusi.

3. Respiratorli koronaviruslar (Coronaviridae).

4. Nafas olish reoviruslari (Reoviridae).

5. Picornaviruslar (Picornaviridae).

Gripp A virusi

Virion sharsimon shaklga ega va diametri 80-120 nm. Virus genomi umumiy molekulyar og'irligi 5 MD bo'lgan bir zanjirli parchalangan (8 fragmentli) manfiy RNK bilan ifodalanadi. Nukleokapsidning simmetriya turi spiraldir. Virion tarkibida ikkita glikoprotein - gemagglutinin va neyraminidaza bo'lgan superkapsid (membrana) mavjud bo'lib, ular membrana ustida turli xil tikanlar shaklida chiqib turadi.

Viruslar o'tkir respirator kasalliklarning qo'zg'atuvchisi hisoblanadi. Gripp viruslari, parainfluenza, rinoviruslar, respirator sinsitial virus va adenoviruslar keltirib chiqaradigan kasalliklarning namoyon bo'lish xususiyatlari. Laboratoriya usullari ularning diagnostikasi.

Virion sharsimon shaklga ega va diametri 80-120 nm. Virus genomi umumiy molekulyar og'irligi 5 MD bo'lgan bir zanjirli parchalangan (8 fragmentli) manfiy RNK bilan ifodalanadi. Nukleokapsidning simmetriya turi spiraldir. Virion tarkibida ikkita glikoprotein - gemagglutinin va neyraminidaza bo'lgan superkapsid (membrana) mavjud bo'lib, ular membrana ustida turli xil tikanlar shaklida chiqib turadi.

Odamlar, sutemizuvchilar va qushlarning A grippi viruslarida antigen bilan farq qiluvchi 13 turdagi gemagglutinin topildi, ularga doimiy raqamlash (H1 dan H13 gacha) berildi.

Neyraminidaza (N) molekulyar og'irligi 200-250 kDa, har bir monomerning molekulyar og'irligi 50-60 kDa bo'lgan tetramer.

Gripp A virusida neyraminidazaning 10 xil varianti mavjud

Laboratoriya diagnostikasi. Tadqiqot uchun material nazofarengeal oqindi bo'lib, uni yuvish yoki paxta gazli tamponlar va qon yordamida olinadi. Quyidagi diagnostika usullari qo'llaniladi:

1. Virusologik - tovuq embrionlari, yashil maymun buyrak hujayralari madaniyati (Vero) va itlar (MDSC) infektsiyasi. Hujayra madaniyati A(H3N2) va B viruslarini ajratish uchun ayniqsa samaralidir.

2. Serologik - RTGA, RSK va ferment immunoassay usuli yordamida o'ziga xos antikorlarni aniqlash va ularning titrini (juftlangan sarumlarda) oshirish.

3. Tezlashtirilgan diagnostika sifatida immunofluoresans usuli qo'llaniladi, bu burun shilliq qavatidan barmoq izlari smearlarida yoki bemorlarning nazofarenksidan tamponlarda virusli antigenni tezda aniqlash imkonini beradi.

4. Virusni (virusli antigenlarni) aniqlash va identifikatsiya qilish uchun RNK probi va PCR usullari taklif qilingan.

Maxsus profilaktika

1) zaiflashtirilgan virusdan yashaydi; 2) butun virionni o'ldirgan; 3) subvirion vaktsina (parchalangan virionlardan); 4) faqat gemagglyutinin va neyraminidazani o'z ichiga olgan subunit vaktsina.

Gripp viruslari (ortomiksoviruslar). Umumiy xususiyatlar. Superkapsid oqsillari, ularning vazifalari, gripp epidemiologiyasi uchun o'zgaruvchanlikning (shift va drift) ahamiyati. Laboratoriya diagnostikasi usullari. Grippning oldini olish uchun ishlatiladigan vaktsinalar.

O'tkir yuqumli kasallik, isitma, jigar shikastlanishi bilan. Antroponoz.

Taksonomiyasi, morfologiyasi, antigen tuzilishi: Picornaviridae oilasi, gepatovirus jinsi. Tur turi bitta serotipga ega. Bu RNK virusi, oddiy tashkil etilgan va bitta virusga xos antijenga ega.

Kultivatsiya: virus hujayra madaniyatida o'stiriladi. Ko'payish sikli enteroviruslarga qaraganda uzoqroq, sitopatik ta'sir ko'rsatilmaydi.

Qarshilik: issiqlikka chidamli; 5 daqiqa qaynatish orqali faolsizlantiriladi. Nisbatan barqaror tashqi muhit(suv).

Epidemiologiya. Manba: bemorlar. INFEKTSION mexanizmi fekal-og'izdir. Viruslar najas bilan erta to'kiladi klinik ko'rinishlari. Sariqlik paydo bo'lishi bilan virusli sekretsiya intensivligi pasayadi. Viruslar suv orqali yuqadi, oziq-ovqat mahsulotlari, qo'llar.

Ko'pincha 4 yoshdan 15 yoshgacha bo'lgan bolalar ta'sir qiladi.

Mikrobiologik diagnostika. Tadqiqot uchun material sarum va najas hisoblanadi. Tashxis asosan Elishay, RIA va immun elektron mikroskopiya yordamida qonda IgM ni aniqlashga asoslangan. Xuddi shu usullar najasda virusli antijenni aniqlashi mumkin. Virusologik tekshiruv o'tkazilmaydi.

3. Grippning virusologik diagnostikasi. Virusni ajratish, uning turini aniqlash. Grippni tashxislashning serologik usullari: RSK, RTGA. Floresan antikorlari yordamida tezlashtirilgan diagnostika usuli.

Mikrobiologik diagnostika. "Gripp" tashxisi (1) virusni izolyatsiya qilish va identifikatsiyalash, (2) bemorning hujayralarida virusli antijenlarni aniqlash, (3) bemorning zardobida virusga xos antikorlarni qidirishga asoslanadi. Tadqiqot uchun material tanlashda virus bilan zararlangan hujayralarni olish juda muhim, chunki ularda virus replikatsiyasi sodir bo'ladi. Tadqiqot uchun material nazofarengeal oqimdir. Antikorlarni aniqlash uchun bemorning juftlashgan qon zardobi tekshiriladi.

Ekspress diagnostika. Virusli antijenler RIF (to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita variantlar) va Elishay yordamida test materialida aniqlanadi. PCR yordamida materialdagi viruslarning genomini aniqlash mumkin.

Virusologik usul. Shtammlarni etishtirish uchun optimal laboratoriya modeli tovuq embrionidir. Viruslarni ko'rsatish laboratoriya modeliga qarab amalga oshiriladi (o'lim, klinik va patomorfologik o'zgarishlar, CPP, "blyashka shakllanishi", "rang testi", RHA va gemodsorbsiya). Viruslar antigen tuzilishi bilan aniqlanadi. Ular viruslarning RSK, RTGA, Elishay, RBN (biologik neytrallash reaksiyasi) va boshqalardan foydalanadi. Odatda gripp viruslarining turi RSKda, kichik turi - RTGAda aniqlanadi.

Serologik usul. Tashxis 10 kunlik interval bilan olingan bemorning juftlashgan sarumlarida antikor titrining to'rt baravar oshishi bilan qo'yiladi. RTGA, RSK, ELISA, RBN viruslari qo'llaniladi.

Adenoviruslar, xossalarining xarakteristikalari, guruh tarkibi. Odamlar uchun patogen adenoviruslar. Adeno patogenezining xususiyatlari virusli infektsiyalar, adenoviruslarni etishtirish usullari. Adenovirus kasalliklari diagnostikasi.

Adenoviridae oilasi ikki avlodga bo'linadi: Mastadenovirus - sutemizuvchilarning adenoviruslari, unga odam adenoviruslari (41 serovar), maymun (24 serovar), shuningdek, qoramol, ot, qo'y, cho'chqa, it, sichqon, amfibiyalar kiradi; va Aviadenovirus - parranda adenoviruslari (9 serovar).

Adenoviruslarda superkapsid yo'q. Virion ikosahedr shakliga ega - simmetriyaning kubik turi, diametri 70-90 nm. Kapsid diametri 7-9 nm bo'lgan 252 ta kapsomerdan iborat.

Virionda kamida 7 ta antijen aniqlangan. Inkubatsiya davri 6-9 kun. Virus ko'payadi epiteliya hujayralari yuqori nafas olish yo'llari, ko'zning shilliq qavati. O'pkaga kirib, bronxlar va alveolalarga ta'sir qilishi, og'ir pnevmoniyaga olib kelishi mumkin; adenoviruslarning xarakterli biologik xususiyati tropizmdir limfoid to'qima.

Adenovirus kasalliklarini nafas yo'llari va ko'zlarning shilliq qavatining kataral yallig'lanishi, submukozal limfoid to'qimalar va mintaqaviy limfa tugunlarining ko'payishi bilan birga febril sifatida tavsiflash mumkin.

Laboratoriya diagnostikasi. 1. Immunofluoresans yoki IFM usullari yordamida zararlangan hujayralardagi virus antijenlarini aniqlash. 2. Viruslarni izolyatsiya qilish. Tadqiqot uchun material nazofarengeal va kon'yunktiva oqishi, qon, najas (virus nafaqat kasallikning boshida, balki 7-14-kunlarda ham ajratilishi mumkin). Virusni ajratib olish uchun adenoviruslarning barcha serovarlariga sezgir bo'lgan inson embrionining birlamchi tripsinlangan hujayra madaniyati (shu jumladan diploid) ishlatiladi. Viruslar sitopatik ta'siri va RSC yordamida aniqlanadi, chunki ularning barchasida umumiy komplement bog'lovchi antigen mavjud. Identifikatsiya hujayra madaniyatida RTGA va RN yordamida turga xos antijenler tomonidan amalga oshiriladi. 3. RSC yordamida juftlashgan bemor sarumlarida antikor titrining oshishini aniqlash. Turga xos antikorlarning titrini oshirishni aniqlash hujayra madaniyatida RTGA yoki PH da mos yozuvlar adenovirus serostreinlari bilan amalga oshiriladi.

5. Coxsackie va ECHO viruslari. Ularning xususiyatlarining xususiyatlari. Guruh tarkibi. Coxsackie va ECHO viruslari keltirib chiqaradigan kasalliklarni mikrobiologik diagnostika qilish usullari.

Coxsackie barcha enteroviruslarning eng kardiotropidir. 20 yoshgacha bo'lgan bemorlarning 20-40 foizida Coxsackie infektsiyasi miyokardit bilan murakkablashadi. Coxsackie viruslari ikki guruh bilan ifodalanadi: Coxsackie A guruhi 23 ta serovarni o'z ichiga oladi (A1-A22, 24); Coxsackie B guruhi 6 ta serovarni (B1-B6) o'z ichiga oladi.

A va B Coxsackie viruslari odamlarda poliomielitga o'xshash kasalliklardan tashqari, ba'zida falaj bilan kechadigan va o'ziga xos klinik ko'rinishga ega bo'lgan turli xil kasalliklarni keltirib chiqarishi mumkin: aseptik meningit, epidemik miyalji (Bornholm kasalligi), herpangina, kichik kasallik, gastroenterit, o'tkir nafas olish kasalliklari, miokardit

ECHO, ya'ni: E - ichak; C - sitopatogen; H - inson; O - etim - etim. 32 ta serovarga ega.

Coxsackie va ECHO infektsiyalarining manbai odamlardir. Viruslar bilan infektsiya fekal-og'iz yo'li orqali sodir bo'ladi.

Coxsackie va ECHO viruslari keltirib chiqaradigan kasalliklarning patogenezi poliomielit patogeneziga o'xshaydi. Kirish eshiklari burunning shilliq qavati, farenks, ingichka ichak, epiteliy hujayralarida, shuningdek, limfoid to'qimalarda bu viruslar ko'payadi.

Limfoid to'qimalarga yaqinlik quyidagilardan biridir xarakterli xususiyatlar bu viruslar. Ko'payishdan so'ng viruslar limfaga, keyin esa qonga kirib, virusemiya va infektsiyani umumlashtirishga olib keladi.

Qon oqimiga kirgandan so'ng, viruslar gematogen yo'l bilan butun tanaga tarqalib, tropizmga ega bo'lgan organlar va to'qimalarda tanlab joylashadi.

Diagnostika usullari enterovirus kasalliklari. virusologik usul va turli serologik reaksiyalardan foydalanish. Tadqiqot enteroviruslarning butun guruhida o'tkazilishi kerak. Ularni ajratish uchun ichak tarkibi, yuvish va tomoqdagi tamponlar, kamroq tez-tez miya omurilik suyuqligi yoki qon ishlatiladi va bemor o'lgan taqdirda tomoqdagi to'qimalarning bo'laklari tekshiriladi. turli organlar. Sinov materiali hujayra madaniyatini (polioviruslar, ECHO, Coxsackie B va Coxsackie A ning ba'zi serovarlari), shuningdek, yangi tug'ilgan sichqonlarni (Coxsackie A) yuqtiradi.

Izolyatsiya qilingan viruslarni tiplash neytrallash reaktsiyalarida, RTGA, RSK, yog'ingarchilik reaktsiyalarida, turli xil birikmalardagi sarumlarning standart aralashmalari yordamida amalga oshiriladi. Enterovirus infektsiyalari paytida odamning qon zardobida antikorlarni aniqlash uchun bir xil serologik reaktsiyalar (RN, rang reaktsiyalari, RTGA, RSK, yog'ingarchilik reaktsiyalari) qo'llaniladi, ammo bu maqsadlar uchun har bir bemordan juft zardoblar bo'lishi kerak (ichida). o'tkir davr va 2-3 haftadan keyin. kasallikning boshlanishidan boshlab). Antikor titri kamida 4 marta oshganda reaktsiyalar ijobiy hisoblanadi. Ushbu ikki usul bilan IPM ham qo'llaniladi (antikorlarni yoki antijenlarni aniqlash uchun).

Gepatit B. Virionning asosiy xususiyatlarining tuzilishi va xususiyatlari. Yuzaki antigen, uning ahamiyati. Virusning hujayra bilan o'zaro ta'sirining xususiyatlari. INFEKTSION usullari. Laboratoriya diagnostikasi usullari. Maxsus profilaktika.

Gepatit B virusi, HBV Virion uchta asosiy antijenni o'z ichiga oladi

1. HBsAg - yuzaki (yuzaki), yoki eruvchan (eruvchan), yoki avstraliyalik antigen.

2. HBcAg - yadro antijeni (tishli antigen).

3. HBeAg - antigen e, virionning yadrosida lokalizatsiya qilingan

Virionning o'zi, Daniya zarrasi sharsimon shaklga ega va diametri 42 nm. Virion superkapsidi uchta oqsildan iborat: asosiy (yadro), katta va o'rta (88.1-rasm). Genom kapsid bilan o'ralgan va molekulyar massasi 1,6 MD bo'lgan ikki zanjirli dumaloq DNK bilan ifodalanadi. DNK taxminan 3200 nukleotiddan iborat, lekin uning ortiqcha zanjiri minus ipdan 20-50% qisqaroq.

Yuzaki antigen - HBsAg - uchta morfologik variant shaklida mavjud: 1) butun virionning superkapsidini ifodalaydi; 2) ichida katta miqdorda sharsimon shaklga ega bo'lgan diametri 20 nm bo'lgan zarrachalar shaklida paydo bo'ladi; 3) 230 nm uzunlikdagi iplar shaklida. Kimyoviy jihatdan ular bir xil. HBsAg bitta umumiy antigen a va ikki juft o'zaro eksklyuziv tipga xos determinantlarni o'z ichiga oladi: d/y va w/r, shuning uchun HBsAg ning to'rtta asosiy kichik turi (va shunga mos ravishda HBV) mavjud: adw, adr, ayw va ayr. Antigen a virusning barcha kichik turlariga umumiy o'zaro immunitet hosil bo'lishini ta'minlaydi.

Sirt antijenini hosil qiluvchi oqsillar glikozillangan (gp) va glikozillanmagan shakllarda mavjud. Glikozillangan gp27, gp33, gp36 va gp42 (raqamlar kDa da mVtni bildiradi). HBV superkapsidi asosiy yoki asosiy S oqsilidan (92%) iborat; o'rta M proteini (4%) va katta yoki uzun L proteini (1%).

Asosiy oqsil - p24/gp27, katta protein - p39/gp42, o'rtacha protein - gp33/gp36.

Hujayra bilan o'zaro ta'sir.

1. Hujayradagi adsorbsiya.

2. Hujayra ichiga retseptorli endotsitoz mexanizmi yordamida kirib borish (chegaralangan chuqur -> chegaralangan pufak -> lizosoma -> nukleokapsidning chiqishi va virus genomining gepatotsitlar yadrosiga kirib borishi).

3. Hujayra ichidagi ko'payish.

Gepatit B virusi bilan kasallanish manbai faqat odamlardir. INFEKTSION nafaqat parenteral, balki jinsiy va vertikal (onadan homilaga) ham sodir bo'ladi.

Hozirgi vaqtda gepatit B ni tashxislashning asosiy usuli virusni yoki uning sirt antijenini - HBsAgni aniqlash uchun teskari passiv gemoglyutinatsiya testidan (RPHA) foydalanish hisoblanadi. Yuqorida aytib o'tilganidek, qonda virusning o'ziga qaraganda bir necha baravar ko'p sirt antijeni mavjud (100-1000 marta). ROPHA reaktsiyasi uchun gepatit B virusiga qarshi antikorlar bilan sezgir bo'lgan eritrotsitlar qo'llaniladi. Qonda antijen mavjud bo'lganda, gemagglyutinatsiya reaktsiyasi paydo bo'ladi. HBsAg virusli antijeniga antikorlarni aniqlash uchun turli xil immunologik usullar qo'llaniladi (RSK, RPGA, IFM, RIM va boshqalar).

Maxsus profilaktika

Gepatit B ga qarshi emlash majburiydir va hayotning birinchi yilida berilishi kerak. Emlash uchun ikki turdagi vaktsina taklif qilingan. Ulardan birini tayyorlash uchun xom ashyo sifatida virus tashuvchilar plazmasi ishlatiladi, chunki u vaktsinani tayyorlash uchun etarli miqdorda virus antijenini o'z ichiga oladi. Ushbu turdagi vaktsinalarni tayyorlashning asosiy sharti ularning to'liq xavfsizligi hisoblanadi.Boshqa turdagi vaktsinalarni ishlab chiqarish uchun genetik muhandislik usullari qo'llaniladi, xususan, antigenik materialni olish uchun xamirturushning rekombinant klonidan foydalaniladi, u sirt antigenini hosil qiladi. gepatit B virusi.

Rossiyada ham kattalar, ham yangi tug'ilgan chaqaloqlar va bolalar uchun vaktsinalar yaratilgan. erta yosh. Emlashning to'liq kursi uchta in'ektsiyadan iborat:

Men dozani - tug'ilgandan keyin darhol; II doza - 1-2 oydan keyin; III doza - hayotning 1-yilining oxirigacha.

Virusli infektsiyalarni laboratoriya diagnostikasi usullari bir nechta katta guruhlarga bo'linadi.

- Virusning o'zini yoki unga antikorlarni to'g'ridan-to'g'ri biologik materialda aniqlashdan iborat to'g'ridan-to'g'ri usullar.

- Bilvosita usullar virusni sezilarli miqdorda sun'iy ishlab chiqarishni va uning keyingi tahlilini o'z ichiga oladi.

Eng dolzarblariga kundalik amaliyot Diagnostika usullariga quyidagilar kiradi:

Serologik diagnostika usullari - antigen-antikor reaktsiyasi (AG-AT) natijasida bemorning qon zardobida ma'lum antikorlar yoki antijenlarni aniqlash. Ya'ni, bemorda ma'lum bir antigenni qidirishda tegishli sun'iy sintez qilingan antikor ishlatiladi va shunga mos ravishda, aksincha, antikorlarni aniqlashda sintezlangan antigenlar qo'llaniladi.

Immunofloressensiya reaktsiyasi (RIF)


Bo'yoq bilan belgilangan antikorlardan foydalanishga asoslangan. Agar virusli antigen mavjud bo'lsa, u etiketli antikorlarga bog'lanadi va mikroskop ostida ma'lum bir rang kuzatiladi, bu ijobiy natija. Ushbu usul bilan, afsuski, natijani miqdoriy talqin qilish mumkin emas, lekin faqat sifatli.

Imkoniyat miqdoriy aniqlash fermentga bog'langan immunosorbent tahlilini (ELISA) beradi. Bu RIF ga o'xshaydi, ammo marker sifatida bo'yoqlar emas, balki rangsiz substratlarni rangli mahsulotlarga aylantiruvchi fermentlar qo'llaniladi, bu esa antigenlar va antikorlarning miqdorini aniqlashga imkon beradi.


- Bog'lanmagan antikorlar va antijenler yuviladi.

- Rangsiz substrat qo'shiladi va biz aniqlayotgan antijenli quduqlarda rang paydo bo'ladi, chunki antigen bilan bog'langan ferment bo'ladi, undan keyin rangli mahsulotning luminesans intensivligi maxsus qurilma yordamida baholanadi.

Antikorlar xuddi shunday tarzda aniqlanadi.

Bilvosita (passiv) gemagglyutinatsiya reaktsiyasi (IPHA).

Usul viruslarning qizil qon hujayralarini bog'lash qobiliyatiga asoslangan. Odatda, qizil qon tanachalari plastinkaning pastki qismiga tushib, tugmachani hosil qiladi. Biroq, agar o'rganilayotgan biologik materialda virus mavjud bo'lsa, u qizil qon hujayralarini quduq tubiga tushmaydigan soyabon deb ataladigan narsaga bog'laydi.

Agar vazifa antikorlarni aniqlash bo'lsa, unda bu yordamida amalga oshirilishi mumkin gemagglyutinatsiyani inhibe qilish reaktsiyasi (HAI). Quduqqa virus va qizil qon tanachalari bilan har xil namunalar tomiziladi. Agar antikorlar mavjud bo'lsa, ular virusni bog'laydi va qizil qon tanachalari pastga tushib, "tugma" hosil qiladi.

Endi o'rganilayotgan viruslarning nuklein kislotalarini to'g'ridan-to'g'ri tashxislash usullariga to'xtalib o'tamiz vaAvvalo, PCR (polimeraza zanjiri reaktsiyasi) haqida. .

Ushbu usulning mohiyati virusning DNK yoki RNK ning ma'lum bir qismini sun'iy sharoitda uni bir necha marta nusxalash orqali aniqlashdir. PCR faqat DNK bilan amalga oshirilishi mumkin, ya'ni RNK viruslari uchun birinchi navbatda teskari transkripsiya reaktsiyasini bajarish kerak.

PCR to'g'ridan-to'g'ri kerakli haroratni saqlaydigan termal sikl yoki termal sikl deb ataladigan maxsus qurilmada amalga oshiriladi. PCR aralashmasi qo'shilgan DNKdan iborat bo'lib, unda bizni qiziqtirgan fragment, primerlar (nuqlein kislotasining qisqa bo'lagi, maqsadli DNKni to'ldiruvchi, komplementar zanjirning sintezi uchun primer bo'lib xizmat qiladi), DNK polimeraza va nukleotidlar mavjud.

PCR siklining bosqichlari:

- Denaturatsiya birinchi bosqichdir. Harorat 95 darajaga ko'tariladi, DNK zanjirlari bir-biridan ajralib chiqadi.

- Primerlarning tavlanishi. Harorat 50-60 darajaga tushiriladi. Primerlar zanjirning to'ldiruvchi mintaqasini topadi va unga bog'lanadi.

- Sintez. Harorat yana 72 ga ko'tariladi, bu primerlardan boshlab, qiz zanjirlarini quradigan DNK polimeraza uchun ish harorati.

Tsikl ko'p marta takrorlanadi. 40 tsikldan so'ng, bitta DNK molekulasi kerakli bo'lakning nusxalarining 10 * 12 darajali nusxalarini hosil qiladi.

Haqiqiy vaqtda PCR o'tkazishda DNK fragmentining sintezlangan nusxalari bo'yoq bilan etiketlanadi. Qurilma porlashning intensivligini qayd qiladi va reaksiya davom etar ekan, kerakli bo'lakning to'planishining grafiklarini tuzadi.

Yuqori ishonchlilik bilan laboratoriya diagnostikasining zamonaviy usullari organizmda patogen virus mavjudligini, ko'pincha kasallikning birinchi belgilari paydo bo'lishidan ancha oldin aniqlash imkonini beradi.

Sarumda aniqlash Patogen antijenlarga qarshi antikorlarning mavjudligi kasallik tashxisini qo'yish imkonini beradi. Serologik tadqiqotlar mikrob antigenlarini, turli biologik faol moddalarni, qon guruhlarini, to'qimalar va o'sma antijenlarini, immun komplekslarni, hujayra retseptorlarini va boshqalarni aniqlash uchun ham qo'llaniladi.

Mikrob ajratilganda Patogen bemordan immun diagnostik zardoblar, ya'ni o'ziga xos antikorlarni o'z ichiga olgan giperimmunizatsiyalangan hayvonlarning qon zardobidan foydalangan holda uning antigenik xususiyatlarini o'rganish orqali aniqlanadi. Bu shunday deyiladi serologik identifikatsiya mikroorganizmlar.

Mikrobiologiya va immunologiyada keng qo'llaniladi aglutinatsiya reaktsiyalari, cho'kma, neytrallash, komplement ishtirokidagi reaktsiyalar, etiketli antikorlar va antijenler (radioimmunologik, ferment immunoassay, immunofluoressensiya usullari). Ro'yxatda keltirilgan reaktsiyalar qayd etilgan ta'sir va ishlab chiqarish texnikasida farqlanadi, ammo ularning barchasi antijenning antikor bilan o'zaro ta'sir qilish reaktsiyasiga asoslanadi va antikorlarni ham, antijenlarni ham aniqlash uchun ishlatiladi. Immun reaktsiyalari yuqori sezuvchanlik va o'ziga xoslik bilan tavsiflanadi.

Antikorlarning antigenlar bilan o'zaro ta'sirining xususiyatlari laboratoriyalarda diagnostik reaktsiyalarning asosi hisoblanadi. Reaktsiya in vitro antigen va antikor o'rtasidagi o'ziga xos va o'ziga xos bo'lmagan fazadan iborat. IN o'ziga xos bosqich antikorning faol markazining antigen determinantiga tez o'ziga xos bog'lanishi sodir bo'ladi. Keyin keladi nonspesifik faza - sekinroq, bu ko'rinadigan jismoniy hodisalar bilan namoyon bo'ladi, masalan, floklarning shakllanishi (aglyutinatsiya hodisasi) yoki loyqalik ko'rinishidagi cho'kma. Bu bosqich ma'lum shartlarning mavjudligini talab qiladi (elektrolitlar, muhitning optimal pH darajasi).

Antigen determinantining (epitop) antikorlarning Fab fragmentining faol markaziga bog'lanishi van der Vaals kuchlari, vodorod aloqalari va hidrofobik o'zaro ta'sirga bog'liq. Antikorlar bilan bog'langan antigenning kuchi va miqdori antikorlarning yaqinligi, avidligi va valentligiga bog'liq.

Ekspress diagnostika haqidagi savolga:

1. Sof shaklda ajratilgan madaniyatni tashxislash mumkin.
2. Maxsus jihozlangan laboratoriyalarda (ruxsatnoma bo'lishi kerak)
3. Qattiq qoidalarga rioya qilish: izolyatsiya qilingan xona, zarur bo'lgan maxsus himoya kostyumlari, patogen bilan ishlagandan keyin xonani majburiy to'liq sanitariya bilan davolash, ishni tugatgandan so'ng tadqiqotchilarni sanitariya bilan davolash.

Ekspert diagnostika usullari.
1. Bakteriologiya - morf, tinktor, biokimyoviylarni tez o'rganish uchun birlashtirilgan politropik ozuqa muhiti. xususiyatlari. Ferment indikator lentasidan foydalanish, elektrofizik usul, singdirilgan qog'oz disklar usuli sizda boshqacha(glyukoza, laktoza va boshqalar)
2. Fag diagnostikasi.
3. Serodiagnoz - Manchini usuli, Ascoli, RA, RPGA bo'yicha geldagi yog'ingarchilik.
4. Bakterioskopiya - bevosita va bilvosita RIF.

Ekspress diagnostika usullari:
Vabo - M.Z.Ermolyeva, vabo diagnostik sarumli immobilizatsiya stantsiyasi, RIF.
Tulyaremiya - shisha ustidagi RA, RPGA
Chume - faglarni terish, uglevod qog'ozli disk usuli, RPGA.
Sinus yarasi - Ascoli usuli, RIF, RPGA.

O'sish shakli: ularning uchtasi bor: diffuz (fakultativ anaeroblar), pastki (majburiy anaeroblar) va sirt (majburiy aeroblar).

Anaerob bakteriyalarning sof madaniyatini izolyatsiya qilish

Laboratoriya amaliyotida siz ko'pincha anaerob mikroorganizmlar bilan ishlashingiz kerak bo'ladi. Ular aeroblarga qaraganda ozuqaviy muhitga ko'proq talabchan, ko'pincha maxsus o'sish qo'shimchalarini talab qiladi, ularni etishtirish paytida kislorodga kirishni to'xtatishni talab qiladi va ularning o'sish muddati uzoqroq. Shuning uchun ular bilan ishlash ancha murakkab va bakteriologlar va laboratoriya texniklaridan jiddiy e'tibor talab qiladi.

Anaerob patogenlarni o'z ichiga olgan materialni atmosfera kislorodining toksik ta'siridan himoya qilish muhimdir. Shuning uchun shprits yordamida ponksiyon paytida yiringli infektsiya o'choqlaridan material olish tavsiya etiladi, materialni olish va uni ozuqaviy muhitga ekish o'rtasidagi vaqt imkon qadar qisqa bo'lishi kerak.

Kislorod bo'lmasligi va past oksidlanish-qaytarilish potentsiali (-20 -150 mV) bo'lishi kerak bo'lgan anaerob bakteriyalarni etishtirish uchun maxsus ozuqaviy muhitlar qo'llanilganligi sababli, ularning tarkibiga o'zgarishlarga reaksiyaga kirishadigan rezazurin, metilen ko'k va boshqalar qo'shiladi. bu potentsialda. U o'sib borishi bilan indikatorlarning rangsiz shakllari tiklanadi va rangini o'zgartiradi: resazurin o'rtacha pushti rangga, metilen ko'k esa o'rtacha ko'k rangga aylanadi. Bunday o'zgarishlar anaerob mikroblarni etishtirish uchun ommaviy axborot vositalaridan foydalanishning mumkin emasligini ko'rsatadi.

Oksidlanishni kamaytirishga yordam beradi tiklash salohiyati muhitga kamida 0,05% agar-agarni kiritish, uning yopishqoqligini oshirish orqali kislorod etkazib berishni kamaytirishga yordam beradi. Bu, o'z navbatida, yangi (ishlab chiqarilgandan keyin ikki soatdan kechiktirmasdan) va kamaytirilgan ozuqa vositalaridan foydalanish orqali ham erishiladi.

Shuni hisobga olish kerakki, anaerob bakteriyalarning fermentativ metabolizm turining o'ziga xos xususiyatlari tufayli ular ozuqaviy komponentlar va vitaminlarga boyroq muhitni talab qiladi. Eng ko'p ishlatiladigan yurak-miya va jigar infuziyalari, soya va xamirturush ekstraktlari, kazein, pepton, triptonning gidrolitik hazm qilishlari. Tween-80, hemin, menadion, butun yoki gemolizlangan qon kabi o'sish omillarini qo'shish majburiydir.

Aerob mikroorganizmlarning sof madaniyatini ajratib olish bir qancha bosqichlardan iborat.
Birinchi kunida (tadqiqotning 1-bosqichi) patologik material steril idishga (probirka, kolba, shisha) olinadi. uchun o'rganiladi ko'rinish, konsistensiyasi, rangi, hidi va boshqa xususiyatlariga qarab surtma tayyorlanadi, bo'yaladi va mikroskopda tekshiriladi. Ba'zi hollarda (o'tkir gonoreya, o'lat), bu bosqichda oldingi tashxis qo'yish mumkin va qo'shimcha ravishda, materialni emlash uchun vositani tanlang. Ishg'ol qilish bakteriologik halqa bilan (ko'pincha ishlatiladi), Drigalskiy usulida spatula va paxta-doka tampon yordamida amalga oshiriladi. Stakanlar yopiladi, teskari buriladi, maxsus qalam bilan imzolanadi va 18-48 yil davomida optimal haroratda (37 ° C) termostatga joylashtiriladi. Ushbu bosqichning maqsadi mikroorganizmlarning izolyatsiya qilingan koloniyalarini olishdir.
Biroq, ba'zida material to'plash uchun u suyuq ozuqa muhitiga sepiladi.

Shubhali koloniyalardan smear tayyorlanadi, patogenlarning morfologik va tinktorial xususiyatlarini o'rganish uchun Gram usulida bo'yaladi va "osilgan" yoki "maydalangan" tomchidagi harakatchan bakteriyalar tekshiriladi. Bu belgilar xarakterlashda juda katta diagnostik ahamiyatga ega individual turlar mikroorganizmlar.
O'rganilayotgan koloniyalarning qoldiqlari atrof-muhit yuzasidan boshqalarga tegmasdan ehtiyotkorlik bilan olib tashlanadi va sof kultura olish uchun agar yoki Petri idishining sektorlariga ozuqaviy muhit bilan emlanadi. Probirkalar yoki kulturali idishlar 18-24 soat davomida optimal haroratda termostatga joylashtiriladi.

Bakteriyalar suyuq ozuqa muhitida ham turlicha o'sishi mumkin, ammo o'sish ko'rinishlarining xususiyatlari qattiq muhitga qaraganda yomonroq.

Bakteriyalar muhitning diffuz loyqaligini keltirib chiqarishi mumkin, uning rangi o'zgarmasligi yoki pigment rangiga ega bo'lmasligi mumkin. Bu o'sish modeli ko'pincha fakultativ anaerob mikroorganizmlarning ko'pchiligida kuzatiladi.

Ba'zan probirkaning pastki qismida cho'kma hosil bo'ladi. U maydalangan, bir hil, yopishqoq, shilimshiq va hokazo bo'lishi mumkin. Uning ustidagi muhit shaffof bo'lib qolishi yoki bulutli bo'lishi mumkin. Agar mikroblar pigment hosil qilmasa, cho'kma ko'k-ko'k yoki sarg'ish rangga ega. Qoidaga ko'ra, anaerob bakteriyalar xuddi shunday tarzda o'sadi.

Parietal o'sish probirkaning ichki devorlariga yopishtirilgan yoriqlar va donalarning shakllanishi bilan namoyon bo'ladi. Atrof-muhit shaffof bo'lib qoladi.

Aerob bakteriyalar yuzaki o'sishga moyil. Nozik, rangsiz yoki mavimsi plyonka ko'pincha sirtda deyarli sezilmaydigan qoplama shaklida hosil bo'ladi, bu vosita chayqalganda yoki chayqalganda yo'qoladi. Film nam, qalin bo'lishi mumkin, ipli, shilimshiq konsistensiyaga ega bo'lishi mumkin va pastadirga yopishib, orqasidan tortadi. Shu bilan birga, zich, quruq, mo'rt plyonka ham mavjud, uning rangi mikroorganizmlar tomonidan ishlab chiqarilgan pigmentga bog'liq.

Agar kerak bo'lsa, smear tayyorlanadi, bo'yaladi, mikroskop ostida tekshiriladi va ajratilgan koloniyalarni olish uchun mikroorganizmlar qattiq ozuqaviy muhit yuzasiga ilmoq bilan emlanadi.

Uchinchi kuni (tadqiqotning 3-bosqichi) mikroorganizmlarning sof madaniyatining o'sish tartibi o'rganiladi va uni identifikatsiya qilish amalga oshiriladi.

Birinchidan, ular muhitda mikroorganizmlarning ko'payish xususiyatlariga e'tibor berishadi va kulturaning tozaligini tekshirish uchun uni Gram usulida bo'yab surtishadi. Agar mikroskopda morfologiyasi, kattaligi va tinktorial (bo'yash qobiliyati) xususiyatlari bir xil turdagi bakteriyalar kuzatilsa, kultura toza degan xulosaga keladi. Ba'zi hollarda, ularning o'sishining ko'rinishi va xususiyatlariga asoslanib, ajratilgan patogenlar turi haqida xulosa chiqarish mumkin. Bakteriyalarning turlarini ularning morfologik xususiyatlariga qarab aniqlash morfologik identifikatsiya deyiladi. Qo‘zg‘atuvchining turini uning madaniy xususiyatlariga qarab aniqlash madaniy identifikatsiya deb ataladi.

Biroq, bu tadqiqotlar ajratilgan mikroblar turi haqida yakuniy xulosa chiqarish uchun etarli emas. Shuning uchun bakteriyalarning biokimyoviy xossalari o'rganiladi. Ular juda xilma-xildir.

Ko'pincha saxarolitik, proteolitik, peptolitik, gemolitik xususiyatlar, dekarboksilaza fermentlarining hosil bo'lishi, oksidaza, katalaza, plazmakoagulaz, DNaz, fibrinolizin, nitratlarning nitritlarga qaytarilishi va boshqalar o'rganiladi. Shu maqsadda mikroorganizmlar (rangli Hiss seriyasi, MPB, tvorog zardobi, sut va boshqalar) bilan emlangan maxsus ozuqa muhitlari mavjud.

Patogen turini biokimyoviy xossalariga qarab aniqlash biokimyoviy identifikatsiya deb ataladi.

O'TKAZISH USULLARI
VA BAKTERİYALARNING SOZ MADANIYATINI IZOLASYON

Muvaffaqiyatli etishtirish uchun, to'g'ri tanlangan ommaviy axborot vositalari va to'g'ri ekilgan urug'lardan tashqari, optimal sharoitlar talab qilinadi: harorat, namlik, shamollatish (havo ta'minoti). Anaeroblarni etishtirish aeroblarga qaraganda qiyinroq, ular ozuqa muhitidan havoni olib tashlash uchun ishlatiladi. turli yo'llar bilan.
Odatda turli mikroorganizmlar aralashmasini o'z ichiga olgan sinov materialidan bakteriyalarning alohida turlarini (sof kultura) ajratib olish har qanday bakteriologik tadqiqotning bosqichlaridan biridir. Izolyatsiya qilingan mikrob koloniyasidan mikroblarning sof madaniyati olinadi.
Sof kulturani qondan ajratib olishda (gemokultura) avval suyuq muhitda “o‘stiriladi”: 10-15 ml sterillangan qon 100-150 ml suyuq muhitga sepiladi. Emlangan qonning ozuqaviy muhitga nisbati 1:10 tasodifiy emas - qonning suyultirilishiga shunday erishiladi (suyultirilmagan qon mikroorganizmlarga zararli ta'sir ko'rsatadi).
Bakteriyalarning sof madaniyatini ajratib olish bosqichlari
I bosqich (mahalliy material)
Mikroskopiya (mikrofloraning taxminiy g'oyasi).
Qattiq ozuqa muhitida ekish (koloniyalarni olish).
II bosqich (izolyatsiya qilingan koloniyalar)
Koloniyalarni o'rganish (bakteriyalarning madaniy xususiyatlari).
Bo'yalgan smeardagi mikroblarni mikroskopik tekshirish
(bakteriyalarning morfologik xususiyatlari).
Sof madaniyatni ajratish uchun ozuqaviy agar nishablariga ekish.
III bosqich (sof madaniyat)
Madaniy, morfologik, biokimyoviy aniqlash
va bakterial kulturalarni aniqlash uchun boshqa xususiyatlar
BAKTERİYALARNI ANSIYLANISH

Izolyatsiya qilingan bakterial madaniyatlarni aniqlash bakteriyalarning morfologiyasini, ularning madaniy, biokimyoviy va har bir turga xos bo'lgan boshqa xususiyatlarini o'rganish orqali amalga oshiriladi.


Tegishli ma'lumotlar.


  • 13. Spiroxetalar, ularning morfologiyasi va biologik xossalari. Odamlar uchun patogen turlar.
  • 14. Rikketsiya, ularning morfologiyasi va biologik xossalari. Yuqumli patologiyada rikketsiyaning roli.
  • 15. Mikoplazmalarning morfologiyasi va ultrastrukturasi. Odamlar uchun patogen turlar.
  • 16. Xlamidiya, morfologiyasi va boshqa biologik xususiyatlari. Patologiyadagi roli.
  • 17. Zamburug’lar, ularning morfologiyasi va biologik xususiyatlari. Taksonomiya tamoyillari. Odamlarda qo'ziqorinlar keltirib chiqaradigan kasalliklar.
  • 18. Protozoa, ularning morfologiyasi va biologik xususiyatlari. Taksonomiya tamoyillari. Odamlarda protozoa keltirib chiqaradigan kasalliklar.
  • 19. Viruslarning morfologiyasi, ultrastrukturasi va kimyoviy tarkibi. Tasniflash tamoyillari.
  • 20. Virusning hujayra bilan o'zaro ta'siri. Hayotiy tsikl fazalari. Viruslarning persistentligi va persistent infeksiyalar tushunchasi.
  • 21. Virusli infeksiyalarni laboratoriya diagnostikasi tamoyillari va usullari. Viruslarni etishtirish usullari.
  • 24. Bakteriya genomining tuzilishi. Mobil genetik elementlar, ularning bakteriyalar evolyutsiyasidagi roli. Genotip va fenotip haqida tushuncha. O'zgaruvchanlik turlari: fenotipik va genotipik.
  • 25. Bakterial plazmidlar, ularning vazifalari va xossalari. Gen injeneriyasida plazmidlardan foydalanish.
  • 26. Genetik rekombinatsiyalar: transformatsiya, transduksiya, konjugatsiya.
  • 27. Genetika muhandisligi. Diagnostik, profilaktika va terapevtik preparatlarni olish uchun genetik muhandislik usullaridan foydalanish.
  • 28. Mikroblarning tabiatda tarqalishi. Tuproq, suv, havo mikroflorasi, uni o'rganish usullari. Sanitariya ko'rsatkichli mikroorganizmlarning xususiyatlari.
  • 29. Odam organizmining normal mikroflorasi, uning fiziologik jarayonlar va patologiyadagi ahamiyati. Disbakterioz haqida tushuncha. Oddiy mikroflorani tiklash uchun preparatlar: eubiotiklar (probiyotiklar).
  • 31. Infektsiyaning namoyon bo'lish shakllari. Bakteriyalar va viruslarning chidamliligi. Relaps, reinfeksiya, superinfeksiya tushunchasi.
  • 32. Yuqumli jarayonning rivojlanish dinamikasi, uning davrlari.
  • 33. Infeksion jarayonda mikroorganizmlarning roli. Patogenlik va virulentlik. Virulentlikning o'lchov birliklari. Patogenlik omillari haqida tushuncha.
  • 34. Patogenlik omillarining o.V bo'yicha tasnifi. Buxarin. Patogenlik omillarining xususiyatlari.
  • 35. Immunitet haqida tushuncha. Immunitet turlari.
  • 36. Organizmning infektsiyaga qarshi nospesifik himoya omillari. I.I.ning roli. Mechnikov immunitetning hujayra nazariyasini shakllantirishda.
  • 39. Immunoglobulinlar, ularning molekulyar tuzilishi va xossalari. Immunoglobulinlar sinflari. Birlamchi va ikkilamchi immun javob.
  • 40. Jail va Kumbs bo'yicha yuqori sezuvchanlikning tasnifi. Allergik reaktsiyaning bosqichlari.
  • 41. Darhol yuqori sezuvchanlik. Yayilish mexanizmlari, klinik ahamiyati.
  • 42. Anafilaktik shok va sarum kasalligi. Voqea sabablari. Mexanizm. Ularning ogohlantirishi.
  • 43. Kechiktirilgan yuqori sezuvchanlik. Teri allergiyasi testlari va ulardan ayrim yuqumli kasalliklar diagnostikasida foydalanish.
  • 44. Antiviral, antifungal, antitumor, transplantatsiya immunitetining xususiyatlari.
  • 45. Klinik immunologiya tushunchasi. Inson immunitetining holati va unga ta'sir qiluvchi omillar. Immunitet holatini baholash: asosiy ko'rsatkichlar va ularni aniqlash usullari.
  • 46. ​​Birlamchi va ikkilamchi immunitet tanqisligi.
  • 47. In vitroda antigenning antikor bilan o'zaro ta'siri. Tarmoq tuzilmalari nazariyasi.
  • 48. Agglyutinatsiya reaksiyasi. Komponentlar, mexanizm, o'rnatish usullari. Ilova.
  • 49. Kumbs reaksiyasi. Mexanizm. Komponentlar. Ilova.
  • 50. Passiv gemagglyutinatsiya reaksiyasi. Mexanizm. Komponentlar. Ilova.
  • 51. Gemagglyutinatsiyani inhibe qilish reaksiyasi. Mexanizm. Komponentlar. Ilova.
  • 52. Cho'kma reaktsiyasi. Mexanizm. Komponentlar. Sahnalashtirish usullari. Ilova.
  • 53. Komplementni biriktirish reaksiyasi. Mexanizm. Komponentlar. Ilova.
  • 54. Toksinni antitoksin bilan zararsizlantirish reaksiyasi, hujayra kulturasida va laboratoriya hayvonlari organizmida viruslarni zararsizlantirish. Mexanizm. Komponentlar. Sahnalashtirish usullari. Ilova.
  • 55. Immunofloressensiya reaksiyasi. Mexanizm. Komponentlar. Ilova.
  • 56. Ferment immunoassay. Immunoblotting. Mexanizmlar. Komponentlar. Ilova.
  • 57. Vaktsinalar. Ta'rif. Vaktsinalarning zamonaviy tasnifi. Vaktsina mahsulotlariga qo'yiladigan talablar.
  • 59. Vaktsinalarning oldini olish. Vaktsinalar o'ldirilgan bakteriyalar va viruslardan tayyorlanadi. Pishirish tamoyillari. O'ldirilgan vaktsinalarga misollar. Bog'langan vaktsinalar. O'ldirilgan vaktsinalarning afzalliklari va kamchiliklari.
  • 60. Molekulyar vaktsinalar: toksoidlar. Kvitansiya. Yuqumli kasalliklarning oldini olish uchun toksoidlardan foydalanish. Vaktsinalarga misollar.
  • 61. Genetik injeneriyali vaksinalar. Kvitansiya. Ilova. Afzalliklari va kamchiliklari.
  • 62. Vaktsina terapiyasi. Terapevtik vaksinalar haqida tushuncha. Kvitansiya. Ilova. Harakat mexanizmi.
  • 63. Diagnostik antigen preparatlar: diagnostiklar, allergenlar, toksinlar. Kvitansiya. Ilova.
  • 67. Immunomodulyatorlar haqida tushuncha. Ishlash printsipi. Ilova.
  • 69. Kimyoterapiya preparatlari. Kimyoterapevtik indeks tushunchasi. Kimyoterapevtik dorilarning asosiy guruhlari, ularning antibakterial ta'sir qilish mexanizmi.
  • 71. Antibiotiklarga sezuvchanlikni aniqlash usullari
  • 71. Mikroorganizmlarning dori vositalariga chidamliligi va uning paydo bo'lish mexanizmi. Mikroorganizmlarning shifoxona shtammlari haqida tushuncha. Giyohvand moddalarga chidamlilikni bartaraf etish usullari.
  • 72. Yuqumli kasalliklarni mikrobiologik diagnostika qilish usullari.
  • 73. Tifo va paratif isitmasi qo'zg'atuvchilari. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 74. Escherixiozning patogenlari. Taksonomiya. Xarakterli. Oddiy va patologik sharoitda ichak tayoqchasining roli. Mikrobiologik diagnostika. Davolash.
  • 75. Shigelloz qo'zg'atuvchilari. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Davolash.
  • 76. Salmonellyoz qo'zg'atuvchilari. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 77. Vabo qo'zg'atuvchilari. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 78. Stafilokokklar. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 79. Streptokokklar. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Davolash.
  • 80. Meningokokklar. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 81. Gonokokklar. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Davolash.
  • 82. Tulyaremiya qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 83. Kuydirgi qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 84. Brutselloz qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 85. Vabo qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 86. Anaerob gaz infektsiyasining patogenlari. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 87. Botulizm qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 88. Qoqsholning qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 89. Spora hosil qilmaydigan anaeroblar. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Davolash.
  • 91. Ko'k yo'tal va ko'k yo'tal qo'zg'atuvchilari. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 92. Sil kasalligining patogenlari. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 93. Aktinomisetalar. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Davolash.
  • 94. Rikketsiozning patogenlari. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 95. Xlamidiya qo'zg'atuvchilari. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Davolash.
  • 96. Sifilis qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Davolash.
  • 97. Leptospiroz qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 98. Ixodid shomilli borreliozning qo'zg'atuvchisi (Layma kasalligi). Taksonomiya. Xarakterli. Mikrobiologik diagnostika. Davolash.
  • 100. Qo'ziqorinlarning tasnifi. Xarakterli. Inson patologiyasidagi roli. Laboratoriya diagnostikasi. Davolash.
  • 101. Mikozlarning tasnifi. Yuzaki va chuqur mikozlar. Candida jinsining xamirturushga o'xshash qo'ziqorinlari. Inson patologiyasidagi roli.
  • 102. Grippning qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 103. Poliomielit qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika.
  • 104. Gepatit a va e ning patogenlari Taksonomiya. Xarakterli. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika.
  • 105. Shomil ansefalitining qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika.
  • 106. Quturgan agenti. Taksonomiya. Xarakterli. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 107. Qizilcha qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika.
  • 108. Qizamiqning qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika.
  • 109. Parotitning qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika.
  • 110. Herpes infektsiyasi. Taksonomiya. Xarakterli. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 111. Suvchechak qo'zg'atuvchisi. Taksonomiya. Xarakterli. Laboratoriya diagnostikasi. Davolash.
  • 112. Gepatit b, c, d patogenlari Taksonomiya. Xarakterli. Arava. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika.
  • 113. OIV infektsiyasi. Taksonomiya. Patogenlarning xususiyatlari. Laboratoriya diagnostikasi. Maxsus profilaktika va davolash.
  • 114. Tibbiy biotexnologiya, uning vazifalari va yutuqlari.
  • 118. Antiviral, antibakterial, antifungal, antitumor, transplantatsiya immunitetining xususiyatlari.
  • 119. Virusli infektsiyalarni aniqlash uchun qo'llaniladigan serologik testlar.
  • 119. Serologik reaktsiyalar, virusli infektsiyalarni tashxislash uchun ishlatiladi.

    Sarumda aniqlash Patogen antijenlarga qarshi antikorlarning mavjudligi kasallik tashxisini qo'yish imkonini beradi. Serologik tadqiqotlar mikrob antigenlarini, turli biologik faol moddalarni, qon guruhlarini, to'qima va o'sma antijenlarini, immun komplekslarni, hujayra retseptorlarini va boshqalarni aniqlash uchun ham qo'llaniladi.

    Mikrob ajratilganda Kasallik qo'zg'atuvchisi immun diagnostik sarumlar, ya'ni o'ziga xos antikorlarni o'z ichiga olgan giperimmunizatsiyalangan hayvonlarning qon zardobidan foydalangan holda uning antigenik xususiyatlarini o'rganish orqali bemordan aniqlanadi. Bu shunday deyiladi serologik identifikatsiya mikroorganizmlar.

    Mikrobiologiya va immunologiyada keng qo'llaniladi aglutinatsiya reaktsiyalari, cho'kma, neytrallash, komplement ishtirokidagi reaktsiyalar, etiketli antikorlar va antijenler (radioimmunologik, ferment immunoassay, immunofluoressensiya usullari). Ro'yxatda keltirilgan reaktsiyalar qayd etilgan ta'sir va ishlab chiqarish texnikasida farqlanadi, ammo ularning barchasi antijenning antikor bilan o'zaro ta'sir qilish reaktsiyasiga asoslanadi va ham antikorlarni, ham antijenlarni aniqlash uchun ishlatiladi. Immun reaktsiyalari yuqori sezuvchanlik va o'ziga xoslik bilan tavsiflanadi.

    Antikorlarning antigenlar bilan o'zaro ta'sirining xususiyatlari laboratoriyalarda diagnostik reaktsiyalarning asosi hisoblanadi. Reaktsiya in vitro antigen va antikor o'rtasidagi o'ziga xos va o'ziga xos bo'lmagan fazadan iborat. IN o'ziga xos bosqich antikorning faol markazining antigen determinantiga tez o'ziga xos bog'lanishi sodir bo'ladi. Keyin keladi nonspesifik faza - sekinroq, bu ko'rinadigan jismoniy hodisalar bilan namoyon bo'ladi, masalan, floklarning shakllanishi (aglyutinatsiya hodisasi) yoki loyqalik ko'rinishidagi cho'kma. Bu bosqich ma'lum shartlarning mavjudligini talab qiladi (elektrolitlar, muhitning optimal pH darajasi).

    Antigen determinantining (epitop) antikorlarning Fab fragmentining faol markaziga bog'lanishi van der Vaals kuchlari, vodorod aloqalari va hidrofobik o'zaro ta'sirga bog'liq. Antikorlar bilan bog'langan antigenning kuchi va miqdori antikorlarning yaqinligi, avidligi va valentligiga bog'liq.

    Ekspress diagnostika haqidagi savolga:

    1. Sof shaklda ajratilgan madaniyatni tashxislash mumkin. 2. Maxsus jihozlangan laboratoriyalarda (ruxsat bo'lishi kerak) 3. Qattiq qoidalarga rioya qilish: izolyatsiya qilingan xona, zarur bo'lgan maxsus himoya kostyumlari, patogen bilan ishlagandan so'ng xonani majburiy to'liq tozalash, ishni tugatgandan so'ng tadqiqotchilarni sanitariya qilish. Ekspert diagnostika usullari. 1. Bakteriologiya - morf, tinktor, biokimyoviylarni tez o'rganish uchun birlashtirilgan politropik ozuqa muhiti. xususiyatlari. Ferment indikator lentasidan foydalanish, elektrofizik usul, turli moddalarga (glyukoza, laktoza va boshqalar) namlangan qog'oz disklar usuli 2. Fag diagnostikasi. 3. Serodiagnoz - Manchini usuli, Ascoli, RA, RPGA bo'yicha geldagi yog'ingarchilik. 4. Bakterioskopiya - bevosita va bilvosita RIF. Ekspress diagnostika usullari: vabo - M.Z.Ermolyeva, vabo diagnostik sarum bilan immobilizatsiya stantsiyasi, RIF. Tulyaremiya - shisha ustidagi RA, RPGA Chume - fag terish, karbongidrat qog'oz disk usuli, RPGA. Sinus yarasi - Ascoli usuli, RIF, RPGA. O'sish shakli: ularning uchtasi bor: diffuz (fakultativ anaeroblar), pastki (majburiy anaeroblar) va sirt (majburiy aeroblar).

    Anaerob bakteriyalarning sof madaniyatini izolyatsiya qilish

    Laboratoriya amaliyotida siz ko'pincha anaerob mikroorganizmlar bilan ishlashingiz kerak bo'ladi. Ular aeroblarga qaraganda ozuqaviy muhitga ko'proq talabchan, ko'pincha maxsus o'sish qo'shimchalarini talab qiladi, ularni etishtirish paytida kislorodga kirishni to'xtatishni talab qiladi va ularning o'sish muddati uzoqroq. Shuning uchun ular bilan ishlash ancha murakkab va bakteriologlar va laboratoriya texniklaridan jiddiy e'tibor talab qiladi.

    Anaerob patogenlarni o'z ichiga olgan materialni atmosfera kislorodining toksik ta'siridan himoya qilish muhimdir. Shuning uchun shprits yordamida ponksiyon paytida yiringli infektsiya o'choqlaridan material olish tavsiya etiladi, materialni olish va uni ozuqaviy muhitga ekish o'rtasidagi vaqt imkon qadar qisqa bo'lishi kerak.

    Kislorod bo'lmasligi va past oksidlanish-qaytarilish potentsiali (-20 -150 mV) bo'lishi kerak bo'lgan anaerob bakteriyalarni etishtirish uchun maxsus ozuqaviy muhitlar qo'llanilganligi sababli, ularning tarkibiga o'zgarishlarga reaksiyaga kirishadigan rezazurin, metilen ko'k va boshqalar qo'shiladi. bu potentsialda. U o'sib borishi bilan indikatorlarning rangsiz shakllari tiklanadi va rangini o'zgartiradi: resazurin o'rtacha pushti rangga, metilen ko'k esa o'rtacha ko'k rangga aylanadi. Bunday o'zgarishlar anaerob mikroblarni etishtirish uchun ommaviy axborot vositalaridan foydalanishning mumkin emasligini ko'rsatadi.

    Muhitga kamida 0,05% agarning kiritilishi oksidlanish-qaytarilish potentsialini kamaytirishga yordam beradi, bu esa uning viskozitesini oshirish orqali kislorod etkazib berishni kamaytirishga yordam beradi. Bu, o'z navbatida, yangi (ishlab chiqarilgandan keyin ikki soatdan kechiktirmasdan) va kamaytirilgan ozuqa vositalaridan foydalanish orqali ham erishiladi.

    Shuni hisobga olish kerakki, anaerob bakteriyalarning fermentativ metabolizm turining o'ziga xos xususiyatlari tufayli ular ozuqaviy komponentlar va vitaminlarga boyroq muhitni talab qiladi. Eng ko'p ishlatiladigan yurak-miya va jigar infuziyalari, soya va xamirturush ekstraktlari, kazein, pepton, triptonning gidrolitik hazm qilishlari. Tween-80, hemin, menadion, butun yoki gemolizlangan qon kabi o'sish omillarini qo'shish majburiydir.

    Aerob mikroorganizmlarning sof madaniyatini ajratib olish bir qancha bosqichlardan iborat. Birinchi kunida (tadqiqotning 1-bosqichi) patologik material steril idishga (probirka, kolba, shisha) olinadi. Uning tashqi ko'rinishi, konsistensiyasi, rangi, hidi va boshqa xususiyatlari o'rganiladi, surtma tayyorlanadi, bo'yaladi va mikroskopda tekshiriladi. Ba'zi hollarda (o'tkir gonoreya, o'lat), bu bosqichda oldingi tashxis qo'yish mumkin va qo'shimcha ravishda, materialni emlash uchun vositani tanlang. Ishg'ol qilish bakteriologik halqa bilan (ko'pincha ishlatiladi), Drigalskiy usulida spatula va paxta-doka tampon yordamida amalga oshiriladi. Stakanlar yopiladi, teskari buriladi, maxsus qalam bilan imzolanadi va 18-48 yil davomida optimal haroratda (37 ° C) termostatga joylashtiriladi. Ushbu bosqichning maqsadi mikroorganizmlarning izolyatsiya qilingan koloniyalarini olishdir. Biroq, ba'zida material to'plash uchun u suyuq ozuqa muhitiga sepiladi.

    Shubhali koloniyalardan smear tayyorlanadi, patogenlarning morfologik va tinktorial xususiyatlarini o'rganish uchun Gram usulida bo'yaladi va "osilgan" yoki "maydalangan" tomchidagi harakatchan bakteriyalar tekshiriladi. Ushbu belgilar mikroorganizmlarning ayrim turlarini tavsiflashda juda katta diagnostik ahamiyatga ega. O'rganilayotgan koloniyalarning qoldiqlari atrof-muhit yuzasidan boshqalarga tegmasdan ehtiyotkorlik bilan olib tashlanadi va sof kultura olish uchun agar yoki Petri idishining sektorlariga ozuqaviy muhit bilan emlanadi. Probirkalar yoki kulturali idishlar 18-24 soat davomida optimal haroratda termostatga joylashtiriladi.

    Bakteriyalar suyuq ozuqa muhitida ham turlicha o'sishi mumkin, ammo o'sish ko'rinishlarining xususiyatlari qattiq muhitga qaraganda yomonroq.

    Bakteriyalar muhitning diffuz loyqaligini keltirib chiqarishi mumkin, uning rangi o'zgarmasligi yoki pigment rangiga ega bo'lmasligi mumkin. Bu o'sish modeli ko'pincha fakultativ anaerob mikroorganizmlarning ko'pchiligida kuzatiladi.

    Ba'zan probirkaning pastki qismida cho'kma hosil bo'ladi. U maydalangan, bir hil, yopishqoq, shilimshiq va hokazo bo'lishi mumkin. Uning ustidagi muhit shaffof bo'lib qolishi yoki bulutli bo'lishi mumkin. Agar mikroblar pigment hosil qilmasa, cho'kma ko'k-ko'k yoki sarg'ish rangga ega. Qoidaga ko'ra, anaerob bakteriyalar xuddi shunday tarzda o'sadi.

    Parietal o'sish probirkaning ichki devorlariga yopishtirilgan yoriqlar va donalarning shakllanishi bilan namoyon bo'ladi. Atrof-muhit shaffof bo'lib qoladi.

    Aerob bakteriyalar yuzaki o'sishga moyil. Nozik, rangsiz yoki mavimsi plyonka ko'pincha sirtda deyarli sezilmaydigan qoplama shaklida hosil bo'ladi, bu vosita chayqalganda yoki chayqalganda yo'qoladi. Film nam, qalin bo'lishi mumkin, ipli, shilimshiq konsistensiyaga ega bo'lishi mumkin va pastadirga yopishib, orqasidan tortadi. Shu bilan birga, zich, quruq, mo'rt plyonka ham mavjud, uning rangi mikroorganizmlar tomonidan ishlab chiqarilgan pigmentga bog'liq.

    Agar kerak bo'lsa, smear tayyorlanadi, bo'yaladi, mikroskop ostida tekshiriladi va ajratilgan koloniyalarni olish uchun mikroorganizmlar qattiq ozuqaviy muhit yuzasiga ilmoq bilan emlanadi.

    Uchinchi kuni (tadqiqotning 3-bosqichi) mikroorganizmlarning sof madaniyatining o'sish tartibi o'rganiladi va uni identifikatsiya qilish amalga oshiriladi.

    Birinchidan, ular muhitda mikroorganizmlarning ko'payish xususiyatlariga e'tibor berishadi va kulturaning tozaligini tekshirish uchun uni Gram usulida bo'yab surtishadi. Agar mikroskopda morfologiyasi, kattaligi va tinktorial (bo'yash qobiliyati) xususiyatlari bir xil turdagi bakteriyalar kuzatilsa, kultura toza degan xulosaga keladi. Ba'zi hollarda, ularning o'sishining ko'rinishi va xususiyatlariga asoslanib, ajratilgan patogenlar turi haqida xulosa chiqarish mumkin. Bakteriyalarning turlarini ularning morfologik xususiyatlariga qarab aniqlash morfologik identifikatsiya deyiladi. Qo‘zg‘atuvchining turini uning madaniy xususiyatlariga qarab aniqlash madaniy identifikatsiya deb ataladi.

    Biroq, bu tadqiqotlar ajratilgan mikroblar turi haqida yakuniy xulosa chiqarish uchun etarli emas. Shuning uchun bakteriyalarning biokimyoviy xossalari o'rganiladi. Ular juda xilma-xildir.

    Ko'pincha saxarolitik, proteolitik, peptolitik, gemolitik xususiyatlar, dekarboksilaza fermentlarining hosil bo'lishi, oksidaza, katalaza, plazmakoagulaz, DNaz, fibrinolizin, nitratlarning nitritlarga qaytarilishi va boshqalar o'rganiladi. Shu maqsadda mikroorganizmlar (rangli Hiss seriyasi, MPB, tvorog zardobi, sut va boshqalar) bilan emlangan maxsus ozuqa muhitlari mavjud.

    Patogen turini biokimyoviy xossalariga qarab aniqlash biokimyoviy identifikatsiya deb ataladi.

    BAKTERİYALARNING SOZ MADANIYATINI O'TKAZISH VA IZOLASYON USULLARI Muvaffaqiyatli etishtirish uchun to'g'ri tanlangan muhit va to'g'ri urug'lantirishdan tashqari, optimal sharoitlar kerak: harorat, namlik, shamollatish (havo bilan ta'minlash). Anaeroblarni etishtirish aeroblarga qaraganda qiyinroq, ozuqa muhitidan havoni olib tashlash uchun turli usullar qo'llaniladi. Odatda turli mikroorganizmlar aralashmasini o'z ichiga olgan sinov materialidan bakteriyalarning alohida turlarini (sof kultura) ajratib olish har qanday bakteriologik tadqiqotning bosqichlaridan biridir. Izolyatsiya qilingan mikrob koloniyasidan mikroblarning sof madaniyati olinadi. Sof kulturani qondan ajratib olishda (gemokultura) avval suyuq muhitda “o‘stiriladi”: 10-15 ml sterillangan qon 100-150 ml suyuq muhitga sepiladi. Emlangan qonning ozuqaviy muhitga nisbati 1:10 tasodifiy emas - qonning suyultirilishiga shunday erishiladi (suyultirilmagan qon mikroorganizmlarga zararli ta'sir ko'rsatadi). Bakteriyalarning sof madaniyatini izolyatsiya qilish bosqichlari I bosqich (mahalliy material) Mikroskopiya (mikrofloraning taxminiy g'oyasi). Qattiq ozuqa muhitida ekish (koloniyalarni olish). II bosqich (izolyatsiya qilingan koloniyalar) Koloniyalarni o'rganish (bakteriyalarning madaniy xususiyatlari). Bo'yalgan smeardagi mikroblarni mikroskopik o'rganish (bakteriyalarning morfologik xususiyatlari). Sof madaniyatni ajratish uchun ozuqaviy agar nishablariga ekish. III bosqich (sof kultura) Bakteriya kulturasini aniqlash uchun madaniy, morfologik, biokimyoviy va boshqa xossalarini aniqlash BAKTERİYALARNI Identifikatsiya qilish Izolyatsiya qilingan bakteriya kulturalarini identifikatsiyalash bakteriyalarning morfologiyasini, ularning madaniy, biokimyoviy va har bir turga xos bo‘lgan boshqa xususiyatlarini o‘rganish yo‘li bilan amalga oshiriladi. .

    OIV infektsiyasi
    OIV infektsiyasi - bu odamning immunitet tanqisligi virusi (OIV) keltirib chiqaradigan kasallik, uzoq vaqt limfotsitlar, makrofaglar, asab to'qimalari hujayralarida saqlanib qoladi, natijada immunitet va asab tizimining asta-sekin progressiv shikastlanishi rivojlanadi. asab tizimlari tana, ikkilamchi infektsiyalar, o'smalar, subakut ensefalit va boshqa patologik o'zgarishlar bilan namoyon bo'ladi.
    Patogenlar - t- va 2-toifa odamning immunitet tanqisligi viruslari - OIV-1, OIV-2 (OIV-I, OIV-2, Odamning immunitet tanqisligi viruslari, I, 11 tip) - retroviruslar oilasiga kiradi, kenja oilasiga kiradi. sekin viruslar. Virionlar diametri 100-140 nm bo'lgan sharsimon zarralardir. Virusli zarracha tashqi fosfolipid konvertga ega bo'lib, u o'ziga xos xususiyatlarga ega glikoproteinlarni (strukturali oqsillarni) o'z ichiga oladi. molekulyar og'irlik, kilodaltonlarda o'lchanadi. OIV-1da bular gp 160, gp 120, gp 41. Yadroni qoplaydigan virusning ichki qobig'i molekulyar og'irligi ma'lum bo'lgan oqsillar bilan ham ifodalanadi - p 17, p 24, p 55 (OIV-2) gp 140, gp 105, gp 36, p 16, p 25, p 55) mavjud.
    OIV genomida RNK va teskari transkriptaza (revertaza) fermenti mavjud. Retrovirus genomining xost hujayra genomi bilan bog‘lanishi uchun avval DNK teskari usul yordamida virusli RNK shablonida sintezlanadi. Keyin proviral DNK mezbon hujayraning genomiga integratsiya qilinadi. OIV aniq antijenik o'zgaruvchanlikka ega, bu gripp virusidan sezilarli darajada oshadi.
    Inson tanasida OIVning asosiy maqsadi sirtda olib yuruvchi T-limfotsitlardir eng katta raqam CD4 retseptorlari. OIV hujayraga teskari yo'l bilan kirgandan so'ng, virus o'zining RNK namunasi asosida DNKni sintez qiladi, u mezbon hujayraning genetik apparatiga (T-limfotsitlar) qo'shiladi va u erda provirus holatida umr bo'yi qoladi. T-yordamchi limfotsitlardan tashqari, makrofaglar va B-limfotsitlar ham ta'sir qiladi. neyroglial hujayralar, ichak shilliq qavati va boshqa ba'zi hujayralar. T-limfotsitlar (CD4 hujayralari) sonining kamayishi sababi nafaqat virusning bevosita sitopatik ta'siri, balki ularning infektsiyalanmagan hujayralar bilan birlashishi hamdir. T-limfotsitlarning shikastlanishi bilan bir qatorda, OIV infektsiyasi bilan og'rigan bemorlarda B-limfotsitlarning poliklonal faollashuvi barcha sinflarning immunoglobulinlari, ayniqsa IgG va IgA sintezining oshishi va keyinchalik immunitet tizimining ushbu qismining kamayishi kuzatiladi. Immunitet jarayonlarining disregulyatsiyasi alfa-interferon, beta-2-mikroglobulin a darajasining oshishi va interleykin-2 darajasining pasayishi bilan ham namoyon bo'ladi. Immunitet tizimining disfunktsiyasi natijasida, ayniqsa T-limfotsitlar (CD4) soni 1 mkl qonda 400 yoki undan kam hujayragacha kamayganda, OIVning nazoratsiz replikatsiyasi uchun sharoitlar paydo bo'ladi, bunda virionlar soni sezilarli darajada ko'payadi. tananing turli muhitlari. Immunitet tizimining ko'p qismlarining shikastlanishi natijasida OIV bilan kasallangan odam turli infektsiyalarning patogenlariga qarshi himoyasiz bo'lib qoladi. Immunosupressiyaning kuchayishi sharoitida, normal faoliyat ko'rsatadigan odamda yuzaga kelmaydigan og'ir progressiv kasalliklar rivojlanadi. immun tizimi. JSST ushbu kasalliklarni OITS belgisi (indikatori) kasalliklari sifatida belgilagan.
    Birinchi guruh faqat og'ir immunitet tanqisligiga xos bo'lgan kasalliklardir (CD4 darajasi 200 dan past). Klinik diagnostika OIVga qarshi antikorlar yoki OIV antijenlari mavjud bo'lmaganda amalga oshiriladi.
    Ikkinchi guruhga og'ir immunitet tanqisligi fonida ham, ba'zi hollarda ham usiz rivojlanadigan kasalliklar kiradi. Shuning uchun bunday hollarda tashxisni laboratoriya tasdiqlash zarur.



    mob_info