Stanovení fagocytární aktivity leukocytů. Fagocytární aktivita neutrofilů Fagocytární aktivita leukocytů je pod normou

Fagocytární funkce buněk periferní krve se obvykle hodnotí procentem fagocytárních neutrofilů, fagocytárním počtem (průměrný počet mikroorganismů zachycených jedním granulocytem) a absolutním fagocytárním ukazatelem, což je abstraktní hodnota získaná vynásobením fagocytárního počtu počet fagocytárních neutrofilů v 1 mm 3 krve.

Jinými slovy, absolutní fagocytární indikátor- to je počet mikrobů, které jsou schopny absorbovat neutrofily obsažené v 1 mm 3 krve. Při stagingu fagocytózních reakcí se používá suspenze usmrcených mikroorganismů a pacientova krev. Po inkubaci krve a bakterií v termostatu se připraví nátěry, obarví se a zhodnotí se absorpční kapacita granulocytů.

K fázování fagocytózní reakce se také používá suspenze živých mikroorganismů. V těchto případech bude fagocytární aktivita granulocytů 2-2,5krát nižší než u reakcí s usmrcenými bakteriemi.

Rozetatvorné vlastnosti neutrofilů. V posledních letech bylo zjištěno, že lidské neutrofily mají na povrchu své membrány receptory pro řadu složek komplementu a Fc fragmentů imunoglobulinů. Byla také prokázána přítomnost receptorů pro ovčí erytrocyty na membráně neutrofilů.

Stejně jako lymfocyty lze neutrofily rozdělit do populací podle jejich schopnosti spontánní tvorby růžiček s ovčími erytrocyty a komplementární tvorby růžiček s alogenními erytrocyty za přítomnosti komplementu a imunoglobulinů.

Staging reakcí spontánní a komplementární tvorby rozety neutrofilů je podobný stagingu reakcí spontánní a komplementární tvorby rozety lymfocytů.

Doplňková aktivita krevního séra. Komponenty komplementu jsou biologicky inertní, ale když jsou aktivovány komplexem antigen-protilátka, získávají vlastnosti enzymů a hrají výraznou (ochrannou nebo destruktivní) roli v imunitní cytolýze. Komplement se kromě cytolýzy přímo podílí na různých projevech nespecifické obrany organismu a především na různých fázích zánětlivé reakce, buněčné i humorální.

Z těchto projevů je nejvíce prozkoumaná aktivita komplementu, vedoucí k uvolňování histaminu a zvýšení kapilární permeability, řízení chemotaxe a zvýšení fagocytární schopnosti neutrofilních granulocytů, podpora imunitní adheze a opsonizace fagocytárních částic, narušení buněčné stěny, narušení buněčné stěny, buněčná membrána a další. atd.

Zdá se, že zvýšením permeability malých krevních cév se komplement podílí na řízení migrace granulocytů.

Systém komplementu je reprezentován proteinovými molekulami, které jsou lokalizovány ve frakcích alfa a beta globulinu a skládá se z 11 proteinů krevního séra, které tvoří 9 složek.

K aktivaci systému komplementu jsou zapotřebí speciální látky, v důsledku čehož se komponenty komplementu vzájemně aktivují v přísném pořadí (kaskáda nebo sekvenční inkluze) dvěma způsoby - klasickým a alternativním (nebo properdinem).

Aktivace podél klasické dráhy je způsobena komplexem antigen-protilátka agregovaným s imunoglobuliny tříd G a M nebo komplexy polyanion-polykation, jako je komplex heparin-protamin. V tomto případě první složka komplementu (C1) tvoří C1-esterázu, která štěpí čtvrtou (C4) a druhou (C2) složku komplementu, čímž podporuje tvorbu C3-konvertázy klasické dráhy.

Alternativní cesta aktivace komplementu je evolučně starší. Je nejdůležitější v mechanismu antibakteriální obrany před tvorbou specifických protilátek. Aktivace podél alternativní dráhy je způsobena agregovanými imunoglobuliny tříd A a E, rozpustnými a nerozpustnými polysacharidy bakteriálních membrán a nevyžaduje přítomnost složek komplementu C1, C4 a C2.

V první fázi se na povrchu aktivátoru tvoří enzym v důsledku interakce faktorů složky S3. Enzym je velmi labilní, ale je schopen štěpit S3 a přispívat tak k tvorbě účinnější S3 konvertázy. Tvorba C3 konvertázy a její štěpení třetí složky komplementu jsou klíčovými body obou aktivačních drah.

V této fázi dochází k buněčným interakcím závislým na komplementu. Na indukci imunitních reakcí, eliminaci imunitních komplexů a kontrole bakteriálních infekcí se podílejí tzv. komplementární můstky. Tvorba takových můstků je již dlouho známá jako imunitní adheze.

Tento jev se využívá při komplementárním testu tvorby rozety. Obě cesty aktivace komplementu vedou ke vzniku biologicky aktivních fragmentů složek komplementu. Systém komplementu je tedy aktivován činidly, které jsou neustále přítomny v normálně fungujícím těle.

V procesu evoluce se také vyvinuly mechanismy kontroly její aktivace. Existují dva hlavní mechanismy pro regulaci aktivace komplementu. První je vlastní systému samotnému a spočívá v labilitě C3 konvertázy obou drah, která omezuje aktivaci následných složek komplementu zapojených do kaskády aktivace (C5 - C9).

Druhý je prováděn speciálními přírodními inhibitorovými proteiny. Z nich jsou nejdůležitější inhibitor C1, který tvoří s fragmentem C2 komplex, bránící mu v dalším štěpení C4 a C2, a řídí tak sestavení konvertázy C3 klasické dráhy, a inaktivátor C3, který slouží jako hlavní kontrolní protein systému komplementu, štěpící C3 v kapalné fázi na dva hemolyticky neaktivní proteiny.

Existují důkazy o změnách systému komplementu u různých patologických stavů. Kassel (1977) tak prokázal deficit komplementu a jeho složek u více než 5 000 pacientů s rakovinou různých lokalizací.

Jednotlivé složky sérového komplementu jsou obvykle stanoveny Manciniho radiální imunodifuzní metodou s použitím monospecifických antisér k té či oné složce. Aktivita komplementu se také hodnotí podle jeho schopnosti lyžovat červené krvinky v přítomnosti protilátek proti nim.

Za jednotku hemolytické aktivity komplementu se považuje aktivita potřebná k lýze 50 % červených krvinek v přítomnosti protilátek. Pomocí metody kinetické titrace lze reakci zaznamenávat v průběhu času. Tato reakce je kvalitativní a neposkytuje informace o koncentracích komplementu a jeho složek.

„Korekce imunity u pacientů s rakovinou
prostatická žláza", V.A. Savinov

Laboratorní vyšetření vrozených poruch imunity

Funkční hodnocení B lymfocytů

Stanovení koncentrace imunoglobulinů v krevním séru a dalších biologických tekutinách je jedním z nejdůležitějších integrálních ukazatelů funkční užitečnosti B-lymfocytů a celého systému regulace humorální adaptivní imunity.

Tradičně se stanovovala koncentrace sérových imunoglobulinů radiální imunodifúzí v gelu podle Manciniho. V současné době je tato metoda stále používána, preferovány jsou monoklonální protilátky proti jednotlivým antigenním determinantám (epitopům) charakteristickým pro jednotlivé třídy imunoglobulinů.

Princip Manciniho metody spočívá v tom, že vzorky testovacích sér se umístí do agarových jamek, které obsahují protilátky proti IgM, IgG, IgA ve standardní koncentraci. Imunoglobuliny obsažené v testovacím séru difundují do agaru a při interakci s odpovídajícími protilátkami tvoří precipitační kroužky. Dokud přebytek antigenu zůstává v jamce, dochází k postupnému zvětšování průměru precipitačního prstence. Konečná velikost precipitačního prstence závisí na koncentraci odpovídajících imunoglobulinů. Manciniho metoda umožňuje stanovit koncentraci imunoglobulinů rovnou 10 μg/ml. Chyba metody je 10 %.

K diagnostice vrozených poruch imunity se obvykle stanovuje fagocytární a metabolická aktivita neutrofilů a hodnotí se stav komplementového systému.

Za nejvíce informativní pro hodnocení fagocytárního systému by měl být považován fagocytární index, fagocytární číslo (odráží absorpční kapacitu neutrofilů) a baktericidní index (odráží trávicí schopnost neutrofilu).

Fagocytární index(PI) – procento buněk, které vstoupily do fagocytózy, z jejich celkového počtu.

Fagocytární číslo(NF) je průměrný počet bakterií nebo latexových částic požitých na jeden neutrofil.

Také se konalo Testy spontánní a stimulované fagocytózy pomocí latexových částic. Fagocytóza latexem je založena na vychytávání latexových částic neutrofily (adheze, zachycení a úplné vychytání).

Při spontánním testu se leukocyty izolované z periferní krve smíchají se suspenzí latexových částic; Při provádění testu indukované fagocytózy se k výsledné směsi přidá pyrogenní roztok. Po inkubaci při 37 °C po dobu 30 minut se připraví nátěry a poté se vypočte procento neutrofilů, které absorbovaly latex ve fixovaných a obarvených nátěrech podle Romanovského-Giemsy.

Redukční test nitrotetrazoliové modři–NST test umožňuje vyhodnotit metabolickou aktivitu krevních granulocytů, odhaluje rezervní schopnosti intracelulárních systémů fagocytů. Test NBT je založen na redukci rozpustného barviva, nitromodré tetrazoliové, absorbovaného krevními leukocyty na nerozpustný černý diformazan (intranukleární inkluze - diformazanové shluky) vlivem superoxidového aniontu vzniklého při NADP-H oxidázové reakci, která iniciuje proces stimulace fagocytózy.

Nastavení reakce. Na podložní sklíčko bez tuku se nanese 0,02 ml 0,9% roztoku chloridu sodného, 0,02 ml suspenze neutrofilů a 0,02 ml 0,75% roztoku NBT (nitromodrá tetrazoliová).

Jako náplň se používá komerční lipopolysacharid z gramnegativních bakterií E. coli nebo roztok pyrogenalu (lipopolysacharid ze S. typhi) v ředění 1:10. Do dalšího odtučněného skla se nanese 0,02 ml LPS, 0,02 ml suspenze neutrofilů a 0,02 ml 0,75% roztoku NBT. Umístěte na 30 minut do vlhké komory. Nátěry jsou připraveny, vysušeny a fixovány. Barvete 0,1% neutrálním červeným roztokem. Neutrofily se počítají výpočtem procenta leukocytů s redukovanými granulemi NBT (černý diformazan).

Studium fagocytární aktivity leukocytů- krevní test, který je zaměřen na stanovení rezervních schopností neutrofilů a monocytů plnit svou hlavní funkci - pohlcování a zpracování cizích látek. Test se provádí jako součást komplexu imunogramů. Je indikována pacientům s recidivujícími a chronickými infekcemi, získanými a genetickými imunodeficitními stavy, autoimunitními a onkologickými onemocněními, kteří prodělali složité operace včetně transplantace orgánů. Analyzována je plná krev. Studie je založena na hodnocení fagocytózy fluorescenčně značených bakterií. Normálně tvoří fagocytární granulocyty 82 až 90 % z celkového počtu, fagocytární monocyty – od 75 do 85 %. Připravenost výsledků – až 8 dní.

Fagocytární aktivita leukocytů je laboratorním ukazatelem, který odráží procento neutrofilů a monocytů schopných vázat se na patogenní mikroflóru a trávit ji. Fagocyty jsou buňky, které chrání tělo před rozvojem infekcí. Jsou považovány za součást vrozené imunity, v krvi je zastupují dva typy leukocytů – monocyty a neutrofily. Monocyty jsou velké buňky – makrofágy. Mají výraznou schopnost absorbovat, zpracovávat velké buňky a organické sloučeniny. V místě zánětu fagocytují bakterie, hmotu leukocytů a postižené buňky. Díky tomu jsou tkáně očištěny a připraveny k regeneraci. Neutrofily jsou mikrofágy, na rozdíl od monocytů absorbují pouze malé buňky a organické složky. Po zpracování agens neutrofily odumírají, uvolňují látky poškozující bakterie a plísně a zvyšují tok imunitních buněk do místa zánětu.

Krevní test na fagocytární aktivitu leukocytů umožňuje posoudit rezervu monocytů a neutrofilů pro trávení cizích látek. Změny vlastností fagocytů odrážejí nejen imunologickou reaktivitu organismu, ale i charakteristiky některých dalších procesů – metabolismus bílkovin a sacharidů, přítomnost intoxikace a vyčerpání organismu, aktivitu rekonvalescence po nemocech atd. Analýza se využívá nejen v imunologii a infekčních chorobách, ale i v revmatologii, onkologii, chirurgii. Výsledky studie jsou zobrazeny jako procento aktivních fagocytů k jejich celkovému počtu. Aktivní neutrofily a monocyty jsou detekovány pomocí bakterií s fluorescenčními značkami. Biomateriálem pro studii je plná krev s heparinem.

Indikace

Při podezření na vrozenou nebo získanou imunodeficienci je indikována studie fagocytární aktivity leukocytů. Je předepsán pro vleklé, chronické a opakující se infekční onemocnění - charakteristický znak snížené imunity. Nejčastěji jsou na analýzu odesíláni pacienti s pneumonií, sinusitidou, otitidou, enterokolitidou, kandidózou a cystitidou. Také dlouhodobé nehojící se rány a komplikace po operacích mohou naznačovat nedostatek imunitní obrany. Rozbor se proto provádí při přípravě na operaci a při komplikovaném průběhu pooperačního období, při dlouhodobé rekonvalescenci po úrazech a popáleninách. Mezi další indikace této studie patří alergická, autoimunitní a onkologická onemocnění. Výsledky nám umožňují zhodnotit aktivitu imunitní obrany (fagocytózu) a její roli v rozvoji onemocnění.

Krevní test na fagocytární aktivitu leukocytů umožňuje určit skutečnou připravenost těla odolávat infekcím. Je však třeba si uvědomit, že tento ukazatel se mění pod vlivem mnoha faktorů. Aktivita monocytů a neutrofilů se tedy snižuje po fyzické aktivitě a při psychické únavě a zvyšuje se po konzumaci vysoce kalorického jídla. Dalším omezením analýzy je, že výzkumná procedura trvá až 8 pracovních dnů, získané výsledky odrážejí stav před týdnem.

Příprava na analýzu a sběr materiálu

Pro studium fagocytární aktivity leukocytů se krev odebírá z žíly. Den před testem musíte ze stravy vyloučit alkohol, zrušit sportovní trénink a jinou intenzivní fyzickou aktivitu a vyhnout se stresovým situacím. S lékařem je také nutné konzultovat vliv užívaných léků na výsledek testu, je možné, že některé léky budou dočasně vysazeny. Odběr krve se obvykle provádí ráno, po celonočním hladovění nebo 4 hodiny po jídle.

Krev se odebírá z ulnární žíly pomocí punkce, ke studiu fagocytární aktivity leukocytů se nejčastěji používá metoda hodnocení fagocytózy bakterií s fluorescenční značkou. Monocyty a neutrofily, testovaný materiál, se izolují z krve centrifugací a promytím. Poté se do vzorku zavede kultura luminiscenčních bakterií, směs se resuspenduje a inkubuje a počet leukocytů, které fagocytují bakterie, se určí podle intenzity luminiscence. Výsledky analýzy jsou připraveny do 7-8 pracovních dnů. Fagocytární aktivita monocytů a neutrofilů může být stanovena jinými metodami, např. barvením fagocytovaných buněk (metoda Romanovského-Giemsy), aktivitou lysozomálních enzymů, produkcí cytokinů a přítomností kationtových proteinů.

Normální hodnoty

Výsledek krevního testu na fagocytární aktivitu leukocytů se vyjadřuje jako procento fagocytujících buněk z jejich celkového počtu. Normální hodnoty pro granulocyty jsou od 82 do 90%, pro monocyty - od 75 do 85%. Tyto sazby jsou stejné pro pacienty všech věkových kategorií a obou pohlaví. Fyziologický pokles fagocytózy lze zjistit během těhotenství, po fyzické aktivitě, která neodpovídá úrovni trénovanosti, a po emočním stresu.

Zvyšování a snižování ukazatele

Zvýšení fagocytární aktivity leukocytů nemá diagnostický význam, příčinou mohou být akutní infekce. Aktivita monocytů a neutrofilů se zvyšuje vzhledem k počáteční úrovni.

Analýza fagocytární aktivity leukocytů je imunologická výzkumná metoda. Jeho indikátory umožňují určit rezervní schopnosti krvinek absorbovat a trávit infekční agens, to znamená připravenost těla odolávat rozvoji onemocnění. Pokud jsou výsledky testů pod normou, měli byste se poradit se svým lékařem – imunologem, infekčním specialistou, chirurgem, revmatologem nebo onkologem. Fyziologický pokles výkonnosti lze korigovat správným výběrem pohybové aktivity a prevencí stresu.

Reakce fagocytózy je založena na opsonizaci patogenu.

Z krve je izolována frakce fagocytů, k nim jsou přidány gonokoky a sérum vyšetřovaného pacienta (Am + C). Po určité době jsou nátěry vyšetřeny a je spočítáno alespoň 100 fagocytů. Z nich se určí % ##, které zachytily mikroby. V N FAGOCYTICKÝ INDIKÁTOR = 40-80 %.

FAGOCYTICKÉ ČÍSLO – spočítat počet zachycených mikrobiálních buněk, sečíst a vydělit počtem fagocytů, získat počet mikrobiálních ## absorbovaných jedním fagocytem. V N PF = 1-5.

12. Orgány a buňky imunitního systému.

IMUNITNÍ SYSTÉM– poskytuje specifickou ochranu těla před geneticky cizími molekulami a buňkami, včetně infekčních agens. Zahrnuje orgány (centrální a periferní), ## a cévy (nesoucí imunokompetentní ##).

NA ústřední orgány patří kostní dřeň a brzlík, ve kterých dochází k proliferaci a diferenciaci imunokompetentních buněk: T- a B-lymfocytů (pod vlivem hormonů a mikroprostředí).

Periferní lymfoidní orgány– nahromadění lymfatické tkáně pod sliznicemi trávicího traktu, dýchacích a urogenitálních cest (skupinové lymfatické folikuly, mandle atd.), lymfatické uzliny a slezina. V nich dochází k proliferaci a diferenciaci lymfocytů pod vlivem vstupu Ag do těla.

Buňky imunitního systému:

1) T-thymfocyty (thymus-dependentní) - zrají v thymu, jsou zodpovědné za buněčnou a částečně humorální imunitu.

2) B-lymfocyty (bursa-dependentní) - odpovědné za humorální imunitu, za produkci Ig.

3) Tkáňový makrofág – zachycuje a zpracovává Ag, informace o něm pak předává lymfocytům.

4) Přirození zabijáci - kontakt s cizími ## (B!!, nádor, infikovaný B!!) a zabít je (lyzovat)

5) Velké granulární lymfocyty.

6) Dendritické ## – jsou zodpovědné za vazbu a uložení Ag informací.

7) Podpůrné buňky: neutrofily, mast ##, bazofily, eozinofily, krevní destičky, erytrocyty.

13. T buňky.

T-LYMFOCYTY v procesu diferenciace a proliferace tvoří 4 subpopulace, které se liší svými funkcemi.

T-pomocníci nebo pomocníci (na pomoc) a T-supresory nebo inhibitory (k potlačení) plní regulační funkce. T pomocné buňky rozpoznat determinantní skupiny antigenů na membráně makrofágů a pomocí mediátorů aktivovat B-lymfocyty a T-lymfocyty-efektory. T-supresory inhibují T-pomocníky, B-lymfocyty nebo plazmatické buňky, zpomalují syntézu protilátek.

Efektorové T-lymfocyty zahrnují cytotoxické T-killer buňky (k zabití) a T-efektory produkující lymfokiny . Hlavní funkce cytotoxické zabijácké T buňky – zničit „cílové“ buňky nesoucí odpovídající cizí antigen. T-efektory poskytují buněčně specifickou imunitu a podílejí se na tvorbě odpovědi HRT.

RECEPTORY B a T lymfocyty (jako AT) jsou molekuly imunitního systému rozpoznávající antigen. Jsou schopni rozpoznat pouze jednu specifickou molekulární strukturu determinantní skupiny antigenů (epitop).

Receptory B-lymfocytů jsou části molekul Ig vázající antigen, které jsou syntetizovány daným B-lymfocytem a částečně zůstávají součástí jeho membrány. Jsou fixovány pomocí tzv. „kotevního“ segmentu imunoglobulinu (Fc-end).

Receptory T-lymfocytů jsou strukturou podobné Ig – jedná se o proteiny skládající se ze dvou podjednotek – α- a β-, umístěných na povrchu T-lymfocytu. Místo vázající antigen v molekule T-lymfocytárního receptoru je tvořeno hypervariabilními oblastmi polypeptidových řetězců, připomínajících podobné oblasti Ig, mezi nimiž je vytvořena dutina.

Jak již bylo uvedeno, receptory B a T lymfocytů rozpoznávají antigeny stejným způsobem, ale rozpoznávání probíhá za jiných podmínek. B-lymfocyty jsou schopny rozpoznat a reagovat na FREE AG cirkulující v krevním řečišti, zatímco T-lymfocyty rozpoznávají a jsou aktivovány pouze tím AG, jehož determinantní skupiny jsou prezentovány NA MEMBRÁNĚ MAKROfágu. V obou případech se interakce s antigeny účastní proteiny hlavního histokompatibilního komplexu HLA, které jsou markery individuality každého organismu. Například pomocné T buňky rozpoznávají antigen pouze tehdy, je-li navázán na proteiny MHC II na povrchu makrofágů. T-killery interagují s cizími antigeny umístěnými na povrchu „cílových“ buněk obklopených antigeny MHC I. Tkáňové antigeny MHC I zavedené do těla příjemce během transplantace jakýchkoli orgánů dárce (ledviny, srdce atd.) se stávají „cílemi“ “ pro T-zabijáky. V tomto případě zabijácké T buňky přímo „napadnou“ cizí tkáň, což vede k odmítnutí transplantátu. Zabijácké T-buňky zároveň chrání tělo před virovou infekcí, protože Když se virus množí v buňce, jeho antigeny mohou být integrovány do # membrány. Získání virových antigenů buňkou spolu s jejími existujícími markery - proteiny MHC I z ní dělá „cíl“ pro T-killery, které ničí buňku infikovanou virem.

14. B buňky.

B-LYMFOCYTY. Jejich hlavní funkcí je syntéza Ig, která začíná po zrání na plazmu ##. STIMULEM pro proliferaci je vazba AG epitopů na homologní receptory na membráně. Výsledkem je vytvoření imunologicky homogenního klonu buněk vybavených identickými Ig receptory. Poté dochází vlivem mediátorů k diferenciaci s tvorbou imunologických paměťových buněk a buněk produkujících AT.

Studie fagocytární aktivity leukocytů je krevní test, který je zaměřen na stanovení rezervních schopností neutrofilů a monocytů plnit svou hlavní funkci - absorpci a zpracování cizích látek. Test se provádí jako součást komplexu imunogramů. Je indikována pacientům s recidivujícími a chronickými infekcemi, získanými a genetickými imunodeficitními stavy, autoimunitními a onkologickými onemocněními, kteří prodělali složité operace včetně transplantace orgánů. Analyzována je plná krev. Studie je založena na hodnocení fagocytózy fluorescenčně značených bakterií. Normálně tvoří fagocytární granulocyty 82 až 90 % z celkového počtu, fagocytární monocyty – od 75 do 85 %. Připravenost výsledků – až 8 dní.

Indikace

Příprava na analýzu a sběr materiálu

Normální hodnoty

Zvyšování a snižování ukazatele

Zvýšení fagocytární aktivity leukocytů nemá diagnostický význam, příčinou mohou být akutní infekce. Aktivita monocytů a neutrofilů se zvyšuje vzhledem k počáteční úrovni.

www.krasotaimedicina.ru

Imunolog-alergolog Vladimir Anatoljevič Bolibok

Protilátky nebo imunoglobuliny. Imunoglobuliny jsou poměrně velké a složité proteinové molekuly, které jsou syntetizovány buňkami imunitního systému - plazmatickými buňkami. Plazmatické buňky zase pocházejí z B lymfocytů. Imunoglobuliny mají schopnost vázat se na cizí molekuly (proteiny, lipoproteiny), které se nacházejí jak v rozpuštěném stavu, tak na povrchu virů, bakterií atd. Cizí molekuly mohou být také nalezeny na membráně jejich vlastních buněk, pokud jsou tyto buňky infikovány viry nebo zmutovaly. Protilátky samy o sobě nemohou zabít virus, bakterii nebo buňku ani chemicky zničit toxin produkovaný bakteriemi. Mohou je však za prvé neutralizovat, narušit funkci nebo odstranit toxicitu; za druhé „ukazují“ imunitní systém na „cizince“, který by měl být zničen. Po reakci protilátek s cizorodými molekulami na povrchu virů, bakterií a dalších předmětů s nimi vstupují do boje proteiny komplementového systému, cytotoxické T-lymfocyty nebo fagocytární buňky (neutrofily a monocyty-makrofágy). Vazba protilátek je přitom velmi selektivní – jeden typ protilátek reaguje pouze s cizí molekulou, proti které je produkován. Tato vlastnost se nazývá protilátková specificita. Například protilátky proti viru spalniček nereagují s virem planých neštovic a naopak.

Na základě chemické struktury se imunoglobuliny dělí do 5 tříd:

Imunoglobuliny třídy G. Jedná se o hlavní třídu ochranných protilátek, tvořících více než 80 % všech protilátek cirkulujících v krvi a ve vnitřním prostředí těla. Imunoglobuliny třídy G se začínají produkovat přibližně 7–10 dní po prvním kontaktu s neznámou infekcí a jejich hladina se zvyšuje na maximum přibližně za 30–40 dní. Imunoglobuliny třídy G zůstávají v krvi dlouhou dobu, někdy jejich syntéza pokračuje roky a desetiletí a právě ony poskytují získanou imunitu vůči většině infekcí jak po onemocnění, tak po očkování. Imunoglobuliny G mohou procházet placentou k vyvíjejícímu se dítěti a hromadit se v krvi dítěte před narozením. To má hluboký význam, protože... dítě s mateřskými protilátkami získává imunitu i proti těm infekcím, se kterými matka přichází do styku ve svém obvyklém prostředí.

Imunoglobuliny třídy M. Jedná se o největší protilátky a vznikají jako první při kontaktu s neznámou infekcí. Imunoglobuliny třídy M se objevují během prvního dne od začátku infekce, patrná hladina se vytváří 3. - 4. den, maximálně 7. - 10. den a poté, co je infekce v těle zničena, rychle mizí - po cca 4-6 týdnech. Imunoglobuliny třídy M neprocházejí placentou.

Imunoglobuliny třídy A. Jedná se o tzv. sekreční protilátky. Vylučují se s hlenem přes sliznice do dýchacích cest, podél gastrointestinálního traktu, se slznou tekutinou na spojivkách, s potem a kožním mazem na kůži. Hlavním účelem imunoglobulinů třídy A je zničit a zablokovat infekci dříve, než se dostane do kontaktu s kožními tkáněmi těla, a zabránit infekci vstoupit do těla. Imunoglobuliny třídy A neprocházejí placentou. Imunoglobuliny třídy A jsou vylučovány ve významných množstvích přes mléčné žlázy s mateřským mlékem (zvláště vysoké koncentrace IgA v kolostru) a chrání sliznice novorozence a kojence před infekcí.

Imunoglobuliny třídy D. Koncentrace těchto protilátek v krvi je také velmi nízká – méně než 1 %. Imunoglobuliny třídy D, na rozdíl od jiných tříd imunoglobulinů, nejsou syntetizovány plazmatickými buňkami, ale samotnými lymfocyty a jsou deskvamovanými receptory z povrchu vnější membrány lymfocytů, ve skutečnosti jsou to fragmenty membrány mrtvých lymfocytů. Klinický význam těchto imunoglobulinů nebyl dosud objasněn, proto se jejich hladiny obvykle nekontrolují.

Proteiny komplementového systému.

Protilátky nebo imunoglobuliny, jak je uvedeno výše, jsou schopny se vázat na viry a bakterie, ale nejsou schopny je zabít. Proteiny komplementového systému mají schopnost zabíjet bakterie, plísně a další buňky. Systém komplementu má 9 hlavních a 2 doplňkové proteiny, všechny jsou v krvi a jsou připraveny okamžitě zaútočit na „cizince“ po protilátkách. Tyto proteiny patří mezi enzymové proteiny, konkrétně proteázy. Proteiny komplementového systému jsou schopny se ve vzájemné interakci sestavit do jakési „trubičky“ nebo „jehly“, která propíchne obal viru, mikroba nebo vlastní infikované či cizí buňky přesně v místě, kde protilátky reagovaly. . Tato „jehla“ se nazývá „komplex útoku na membránu“. V důsledku toho se v buněčné membráně vytvoří otvor. Vezmeme-li v úvahu skutečnost, že s mikrobem může současně reagovat více než 10 000 molekul protilátek, vzniká v něm současně stejný počet „děr“ z proteinů. Pod elektronovým mikroskopem vypadá povrch buňky, která je napadena protilátkami s komplementem, jako měsíční krajina posetá krátery po meteoritech. Vzhledem k tomu, že koncentrace solí uvnitř mikrobiální buňky je vyšší než venku, voda se do mikrobiální buňky řítí póry v membráně a mikrob doslova praskne, nabobtnalý vodou. Mikrob je lyžován a jeho zbytky jsou pozřeny fagocyty.

Doplněk je zbraň „rychlé reakce“. Proteiny komplementového systému reagují okamžitě, jakmile protilátky detekují cizince. To je důležité pro ochranu před infekcí v ranách - pokud je aktivita komplementu v těle vysoká, pak infekce, která se do rány dostane, bude zničena téměř okamžitě a rána (chráněná před další infekcí strupem sražené krve) nebude hnisat.

Lysozym.

Tělo produkuje speciální enzymy, které dokážou rozpustit bakteriální membránu, z nichž nejvíce prozkoumaný je lysozym (muramylpeptidáza). Když je skořápka rozpuštěna lysozymem, ztrácí mikrob své patogenní vlastnosti, nemůže dále infikovat tělo a stává se snadnějším cílem pro protilátky a komplement a snazší „potravou“ pro fagocyty.

Interferony.

Jedná se o speciální skupinu bílkovin, které jsou produkovány jak buňkami imunitního systému (leukocyty), tak dalšími buňkami těla, nejčastěji epiteliálními, pokud jsou infikovány virem. Interferony chrání jakékoli jiné buňky v těle před infekcí virem. V opačném případě by jakákoli virová infekce vedla k infekci všech buněk těla.

C-reaktivní protein.

Tento protein je přítomen v krvi ve velmi malých množstvích, ale jeho množství se zvyšuje desítky a stokrát, když se objeví ohnisko bakteriálního zánětu. Proto C-reaktivní protein (čti C) patří mezi proteiny „akutní fáze“. SRB je schopen vázat a „slepovat“ membrány bakterií: během procesu reprodukce zůstávají mikroby slepené a tvoří velký konglomerát mikrobiálních buněk. Za prvé, zabraňuje šíření choroboplodných zárodků krví a lymfou po celém těle. Za druhé, uvnitř takové „kolonie“ mikrobi nedostávají dostatek živin a jejich růst a množení se zpomaluje nebo úplně zastaví. Za třetí, fagocyty reagují na C-reaktivní protein ulpívající na obalu mikrobů zvýšenou aktivitou a začnou tyto mikroby s větší chamtivostí absorbovat.

doktor-boliboku.narod.ru

Fagocytární aktivita neutrofilů

Fagocytární funkce buněk periferní krve se obvykle hodnotí procentem fagocytárních neutrofilů, fagocytárním počtem (průměrný počet mikroorganismů zachycených jedním granulocytem) a absolutním fagocytárním ukazatelem, což je abstraktní hodnota získaná vynásobením fagocytárního počtu počet fagocytárních neutrofilů v 1 mm3 krve. Jinými slovy, absolutní fagocytární ukazatel je počet mikrobů, které jsou schopny absorbovat neutrofily obsažené v 1 mm3 krve. Při stagingu fagocytózních reakcí se používá suspenze usmrcených mikroorganismů a pacientova krev. Po inkubaci krve a bakterií v termostatu se připraví nátěry, obarví se a zhodnotí se absorpční kapacita granulocytů.

K fázování fagocytózní reakce se také používá suspenze živých mikroorganismů. V těchto případech bude fagocytární aktivita granulocytů 2-2,5krát nižší než u reakcí s usmrcenými bakteriemi. Rozetatvorné vlastnosti neutrofilů. V posledních letech bylo zjištěno, že lidské neutrofily mají na povrchu své membrány receptory pro řadu složek komplementu a Fc fragmentů imunoglobulinů. Byla také prokázána přítomnost receptorů pro ovčí erytrocyty na membráně neutrofilů.

Staging reakcí spontánní a komplementární tvorby rozety neutrofilů je podobný stagingu reakcí spontánní a komplementární tvorby rozety lymfocytů. Doplňková aktivita krevního séra. Komponenty komplementu jsou biologicky inertní, ale když jsou aktivovány komplexem antigen-protilátka, získávají vlastnosti enzymů a hrají výraznou (ochrannou nebo destruktivní) roli v imunitní cytolýze. Komplement se kromě cytolýzy přímo podílí na různých projevech nespecifické obrany organismu a především na různých fázích zánětlivé reakce, buněčné i humorální.

Zdá se, že zvýšením permeability malých krevních cév se komplement podílí na řízení migrace granulocytů.

Systém komplementu je reprezentován proteinovými molekulami, které jsou lokalizovány ve frakcích alfa a beta globulinu a skládá se z 11 proteinů krevního séra, které tvoří 9 složek.

„Korekce imunity u pacientů s rakovinou

prostatická žláza", V.A. Savinov

www.medchitalka.ru

Fagocytární aktivita leukocytů periferní krve u různých druhů zvířat

VLASTNOSTI TVORBY CEN VETERINÁRNÍCH SLUŽEB PŘI PÉČI O MALÁ ZVÍŘATA

Trofimová E.N.

Zohlednění zvláštností tvorby cen za veterinární služby při obsluze drobného domácího zvířectva zajišťuje stanovení vědecky podložených cen, které jsou využívány ve veterinární praxi.

VLASTNOSTI TVORBY NABÍDEK NA VETERINÁRNÍ SLUŽBY AT

SERVIS MALÝCH ZVÍŘAT

Výklad rysů tvorby cenových nabídek na veterinární služby při obsluze malých domácích zvířat poskytuje základ vědecky podložených nabídek, které se používají ve veterinární praxi.

MDT 619:616 - 002,5

FAGOCYTICKÁ AKTIVITA LEUKOCYTŮ PERIFERNÍ KRVE U RŮZNÝCH DRUHŮ ZVÍŘAT

Trubkin A.I., Kharitonov M.V.

Federální státní vzdělávací instituce vyššího odborného vzdělávání „Kazaňská státní akademie veterinárního lékařství pojmenovaná po N.E. Bauman"

Klíčová slova: mykobakterium, kmen, fagocytární aktivita.

Krev je jedním z nejjemnějších a nejcitlivějších ukazatelů, indikujících funkční stav těla, odrážející obraz jeho boje s napadajícími mikroorganismy, helminty a jeho reaktivní schopnosti. Vyvinutý I.I. Mečnikovova teorie o ochranné roli fagocytů v boji těla proti patogenním mikrobům, které pronikly do jeho tkání, byla prvním krokem k vybudování teorie protiinfekční imunity. Podle literárních zdrojů má fagocytóza při tuberkulózní infekci nespecifickou protektivní povahu. Existuje však řada pozorování, která naznačují, že u fagocytárních reakcí u tuberkulózy stále existuje určitý stupeň specifičnosti. Například,

PEKLO. Timofeevsky, S.V. Belevolenskaya (1927), G.D. Belanovský (1928) ukázal, že fagocytární buňky peritoneálního exsudátu, periferní krve, sleziny a plic, imunizovaných a přirozeně odolných zvířat nejsou v přítomnosti virulentních mykobakterií zničeny, ale naopak potlačují jejich reprodukci.

Ještě složitější je otázka osudu samotných tuberkulózních mykobakterií, které pronikají do těla, a reakce, kterou v orgánech vyvolávají. Podle literárních zdrojů (A.S. Rabukhin, 1941; Yu.A. Lebedeva, S.M. Sazhina, 1913 atd.) v přítomnosti virulentní tuberkulózní kultury dochází nejprve k neutrofilní leukocytóze a fagocytóze tuberkulózních mykobakterií neutrofilními leukocyty, poté k nekróze vyskytují se leukocyty naplněné patogenem. Zároveň dochází u leukocytů pacientů s nespecifickými plicními chorobami, s omezenou formou tuberkulózy, v případech infekce malými dávkami tuberkulózních bacilů ke zvýšenému přechodu na lymfoblasty. Zároveň dochází k rychlému rozkladu leukocytů pacientů trpících chronickou nebo akutní tuberkulózou.

V tomto ohledu vzbudila určitý zájem srovnávací studie fagocytární aktivity leukocytů periferní krve u různých druhů zvířat, včetně morčat a králíků.

Materiály a metody. Byly použity leukocyty z periferní krve zdravých zvířat: skot, koně, ovce, kozy, psi, králíci, morčata, bílé krysy.

Aby se zabránilo srážení krve, byla heparinizována rychlostí 4 jednotek. injekční heparin na 1 ml krve. Po předběžném promíchání byly zkumavky s krví ponechány pod úhlem 100 při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Poté byly zkumavky umístěny pod úhlem 45° na 15-20 minut. v tomto případě se potřebný počet leukocytů pro provádění experimentů hromadí mezi červenými krvinkami a krevní plazmou ve formě mlhy. Nahromaděné leukocyty byly odsáty a přidány do lahviček obsahujících 5 ml média 199. Po lehkém promíchání vzniklé směsi byly do lahviček přidány mykobakteriální kultury M. bovis kmen N14 při standardním zákalu 1 mg v 1 ml fyziologického roztoku.

Lahve byly uzavřeny pryžovou zátkou a po mírném promíchání umístěny ve svislé poloze do termostatu při teplotě 370 °C.

Nejprve každých 15 minut. (15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120 min) a poté po 3, 4, 5, 6, 24, 48 a 72 hodinách od okamžiku inkubace byly provedeny stěry ze skla speciálně vyrobeného pro tento účel při úhel 200. Stěry fixované v nasyceném roztoku chloridu rtuťnatého po dobu 2-3 minut. a obarveno karbolfuchsinem Ziehl, odbarveno 2,5% roztokem kyseliny sírové. K dodatečnému rozpuštění červených krvinek

ošetřený roztokem kyseliny octové a navíc obarvený 0,5% roztokem methylenové modři smíchaným s 0,5% roztokem sody.

Bylo spočítáno 100 polymorfonukleárních leukocytů, 50 jednotek od každého okraje nátěru, a fagocytární aktivita leukocytů byla vypočtena jako procento.

Fagocytární indikátor byl stanoven následovně: byl spočítán počet fagocytovaných tuberkulózních bacilů ve 100 leukocytech a výsledný počet byl vydělen počtem vyšetřených leukocytů.

Výsledky výzkumu. Studie fagocytární aktivity leukocytů periferní krve u různých druhů zvířat ve vztahu k virulentním kulturám skotu Mycobacterium tuberculosis ukázala, že v prvních 15 minutách. po kontaktu leukocytů se kolem fagocytovaných krvinek hromadí mikrobiální tělíska (atrakce), ale absorpce mikrobiálních tělísek zatím nebyla pozorována. 30 minut po zavedení mykobakterií bylo zjištěno zvýšení fagocytární aktivity leukocytů vůči mykobakteriím u všech druhů zvířat. Jak je vidět z tabulky 1, v prvních 30 min. Bílé krysí leukocyty vykazují významnou fagocytární aktivitu (9,2 ± 2,03 %; P

U produktivních zvířat byla pozorována vysoká fagocytární aktivita leukocytů u kozy 6,2±2,10 % (P

Současně s fagocytární aktivitou leukocytů byl studován fagocytární indikátor - počet fagocytujících mikrobů ve 100 leukocytech. Údaje ukazující průměrný počet absorbovaných mykobakterií na fagocyt jsou uvedeny v tabulce 2. Navíc, aby se vzala v úvahu intenzita fagocytózy, byly všechny fagocytované leukocyty rozděleny do tří skupin: první zahrnovala buňky obsahující 1 až 10 mykobakterií; v našem případě takové buňky tvořily 80 %; ve druhém - od 10 do 20, tyto buňky představovaly 15%; ve třetím - přes 20 mykobakterií, takové buňky tvořily 5 % všech spočítaných buněk.

Jak je vidět z tabulky, počáteční fagocytární indikátor ve vztahu k virulentní kultuře bovinních mykobakterií u všech zvířat byl pod jednou.

* 15 30 45 60 75 90 105 120 3 hodiny 4 hodiny 5 hodin 6 hodin 24 hodin 48 hodin 72 hodin

1. Kůň 3 6,8 ± 1,62 3,5 ± 0,95 4,3 ± 1,10 5,8 ± 1,31 6,4 ± 1,68 8,7 ± 1,62 10,0 ± 2,71 18,5 3 25,1 0.0.0. ,0 ± 3,22 39,0 ± 3,50 43,9 ± 7,72 48,4 ± 6,20 48,7 ± 5.20

2. Kr. roh. hospodářská zvířata 3 5,0 ± 1,03 3,4 ± 0,93 4,8 ± 1,19 5,8 ± 1,14 5,8 ± 1,39 7,4 ± 2,31 12,2 ± 2, 96 19,0 ± 71,3 ± 2,96 19,0 ± 71,3 3.1. ± 6,05 40,0 ± 6,15 41,6 ± 8,07 43,0 ± 8,11 43,2 ± 5,08

3. Ovce 3 5,6 ± 1,11 0,05 4,8 ± 1,05 0,05 6,2 ± 1,21 9,2 ± 2,05 12,4 ± 3,63 15,8 ± 2 ,33 19,8 1 24 2,1. 3,8 ± 4,17 38,8 ± 5,26 40,0 ± 4,15 44,8 ± 5, 17 49,6 ± 5,09 51,8 ± 7,11

4. Koza 3 6,4 ± 2,09 6,2 ± 2,10 7,8 ± 2,20 9,2 ± 2,81 11,0 ± 2,33 19,4 ± 3,17 23,0 ± 3,19 25,14 ± 4,19 25,21 3 ± 4,1.. 40,0 ± 5,08 44,4 ± 5,19 52,0 ± 7,01 55,6 ± 7,12 60,4 ± 7.07

3 40,4 ± 6,09 43,2 ± 6,12 49,5 ± 7,05 55,8 ± 8,11 67,0 ± 8.19

6. Králík 3 4,3 ± 1,90 2,8 ± 0,9 3,1 ± 1,01 3,8 ± 1,56 3,9 ± 1,65 5,0 ± 1,68 5,4 ± 1,35 1,35 1,4 ± 2,06 ± 1,9 ± 2,06 2.1.2. 2,51 17,8 ± 3,19 0,05 24,4 ± 4,11 0,05 27,0 ± 4,92 31,0 ± 5,15 0,05

7. M. příušnice 3 2,6 ± 1,07 1,2 ± 0,32 1,5 ± 0,95 2,0 ± 1,04 2,2 ± 1,00 2,8 ± 1,04 3, 4 ± 1,17 3,23 ± 1.5. 6 ± 1,92 6,3 ± 2,03 11,8 ± 3,09 13,2 ± 3,19 17,2 ± 4,05

8. Bílá krysa 3 8,1 ± 1,35 9,2 ± 2,03 13,0 ± 2,20 19,6 ± 3,35 27,6 ± 5,49 31,6 ± 5,82 37,4 ± 6,05 68,18 ± 6,05 68,11.8. 07 65,0 ± 8,15 72,3 ± 8,03 84,4 ± 8,15 87,0 ± 9,07 87,6 ± 9,19

* - přitahování mykobakterií na povrch leukocytů

Č. Typ zvířat po kontaktu s patogenem prostřednictvím:

15 30 45 60 75 90 105 120 3 hodiny 4 hodiny 4 hodiny 5 hodin 6 hodin 24 hodin 48 hodin 72 hodin

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18

1. Kůň 3 - 0,9 ± 0,03 1,78 ± 0,86 2,82 ± 1,25 3,13 ± 1,08 3,3 ± 1,01 3,9 ± 1,10 4,07 ± 1,51 5,154 ± 5,15 ± 1,51 5,165 ± 1,5. 5,96 ± 1,14 6,8 ± 1,6 8,1 ± 2,90 8,2 ± 1,70

2. Kr. roh. hospodářská zvířata 3 - 0,9 ± 0,02 1,5 ± 0,51 2,0 ± 0,52 2,2 ± 0,91 2,8 ± 0,85 3,1 ± 1,05 3,6 ± 1 ,21 4,0 ± 1,61 4.5 ± 1 21 4,1. 0,12 5,4 ± 1,36 5,6 ± 2,05 5,6 ± 2, 17

3. Ovce 3 - 0,8 ± 0,02 1,8 ± 0,30 2,3 ± 0,15 2,8 ± 0,65 3,3 ± 1,02 4,4 ± 1,65 5,8 ± 2,01 5,8 ± 0,6 ± 6 ± 0,3 6 ± 0,3 6 ± 2,11. 3,18 6,0 ± 2,31 6,8 ± 2,15 6,8 ± 3,11

4. Koza 3 - 0,8 ± 0,11 1,7 ± 0,20 2,1 ± 0,80 2,3 ± 0,7 3,8 ± 1,05 4,0 ± 2,11 4,4 ± 2,01 5,1 ± 2,03 ± 2,6 ± 1 6,1 ± 2,03 6. 2,35 7,6 ± 3,05 7,8 ± 3,12 7,8 ± 3,11

5. Pes 3 0,2 ± 0,01 0,8 ± 0,05 1,7 ± 0,15 2,3 ± 0,17 3,01 ± 1,01 4,5 ± 1,17 5,9 ± 1,29 6,5 ± 1,5 2,05. 2,05 8,7 ± 3,15 9,5 ± 3,05 9,9 ± 3,41 10,1 ± 3, jedenáct

6. Králík 3 0,3 ± 0,02 1,9 ± 0,3 1,9 ± 0,61 1,3 ± 0,85 2,0 ± 0,90 2,1 ± 0,80 2,6 ± 0,31 2,9 ± 0,68 2.0.0.0. 0,01 3,8 ± 1,15 3,9 ± 1,12 3,9 ± 1,05

7. M. příušnice 3 - 0,1 ± 0,01 1,2 ± 0,3 1,6 ± 0,03 1,9 ± 0,2 1,1 ± 0,30 1,3 ± 0,9 1 ,3 ± 0,12 1,8 ± 0,9 ± 0,75 ± 0,5 0,7 ± 0,7 ± 0,64 2,6 ± 1,01 2,6 ± 1,00 2, 7 ± 0,45

8. Bílá krysa 3 0,3 ± 0,1 0,9 ± 0,05 1,0 ± 0,04 2,8 ± 0,31 3,6 ± 1,15 5,3 ± 1,36 6,8 ± 2,02 7,5 ± 08,9 ± 2,9 ± 2,33. 3,06 9,1 ± 2,95 9,9 ± 2,12 10,0 ± 3,01 10,3 ± 3,05

Jak jsou buňky kultivovány, je rychlost fagocytózy významná (P